陈波，杨雪华，张琪，周亚滨，于晓红，徐京育，张雪松，宋雪，张瑜，孙琳琳，牛雯颖

1 黑龙江中医药大学附属第一医院 黑龙江哈尔滨 150040

2 黑龙江中医药大学 黑龙江哈尔滨 150040

室性心律失常（Ventricular arrhythmia，VA）是来源于心室的节律或者速率紊乱导致的心律失常，是临床中比较常见的心律失常类型，其中包括室性期前收缩、室速、室扑和室颤，其发作具有潜在危险性[1]。引起室性心律失常的原因众多，交感神经过度兴奋是室性心律失常发生的主要原因之一，交感神经系统的急慢性激活均可不同程度地引发机体内释放儿茶酚胺类物质，心肌细胞在高浓度儿茶酚胺类物质的作用下，导致细胞膜上的离子通道功能产生病理性改变，进而导致室性心律失常的发生[2]。目前对于交感神经兴奋导致的室性心律失常的治疗，西医主要是以口服β受体阻滞剂药物为主，严重的患者则需要考虑是否进行介入等手术治疗方案进行医治。由于长期口服西药治疗过程中，多数会产生副作用。以及手术费用昂贵等问题，导致了西医治疗心律失常方面存在一定的局限性。

随着不断深入研究，中医药在针对心律失常方面的治疗取了一定的进展，中医治疗方案产生的副作用小，疗效显著，可对患者全身状态的调节，可达到标本兼治的效果。但是临床上的抗心律失常的复方中成药数量不多，早搏灵胶囊作为院内制剂，已经在我院临床应用多年，疗效显著。本研究通过预防性给予早搏灵胶囊药物，观察肾上腺素诱导的家兔产生的室性心律失常情况及心肌组织钠钾ATP酶活性的影响，探讨早搏灵胶囊治疗室性心律失常的疗效与作用机制。

材料与方法

1 实验动物

清洁级新西兰家兔，由哈尔滨医科大学实验动物学部提供（动物合格证号SCXK（黑）2013-001），共32只，体质量（2.28±0.25）kg，雌雄各半。饲养温度17～24℃，通风良好，温度适宜，固体饲料，自由饮水。

2 实验药物与试剂

早搏灵胶囊（由红参、黄芪、麦门冬、当归、山楂、苦参、黄芩、青皮、丹参组成），（规格：每粒 0.25g），由黑龙江中医药大学附属第一医院提供（黑药制字Z20110063，批号：20170324）；盐酸普萘洛尔片（规格：每片10mg），由山西云鹏制药有限公司提供（批号：G160901）；盐酸肾上腺素注射液，由哈尔滨三马兽药业有限公司提供（批号：20160902）；氨基甲酸乙酯（分析纯），由天津市百世化工有限公司提供（批号：20150203）；氯化钠注射液，由哈尔滨三联药业股份有限公司提供（批号：161104D12）；ATP 酶检测试剂盒、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供（批号：201703）。

3 实验仪器

十六导生理记录仪MP150（BIOPAC Systems，Inc.），BECKMAN低温超速离心机（美国贝克曼库尔特有限公司），TGL-16G型高速台式离心机（上海医用分析仪器厂），电子分析天平（梅特勒－托利多仪器（上海） 有限公司），心电机（655I型，上海KOHDEN电子有限公司），BECKMAN－DU640紫外分光光度仪（美国Pharmacia Biotech公司），电热恒温水温箱（HH.W21.CU600，温度范围： 37～65℃，上海医疗器械厂），低温冰箱（MDF－U50V日本三洋公司）。

4 实验方法

将32只健康家兔，随机分配为4组。每组8只，模型组、空白组给予生理盐水40mL/kg灌服；早搏灵组给予8.2mg/ml的早搏灵溶液40mL/kg灌服；对照组给0.16mg/ml的盐酸普萘洛尔片40mL/kg灌服。每日灌胃给药1次，连续7d。次给药1h后，用20%乌拉坦（6ml/kg）耳缘静脉注射麻醉后，记录正常心电图，然后沿着耳缘静脉快速注射0.1%肾上腺素50μg/kg（5s内注射完），同时描记家兔心电图和心率变化，心电观察完成后，处死家兔，取家兔心肌组织，采用定磷法进行测定，通过测酶促反应过程中无机磷的释放量来测定心肌组织钠钾ATP酶的活性。

5 统计学处理

本实验数据采用SPSS 23.0分析软件进行统计分析，计量资料都用均数±标准差（）来表示，若数据符合正态分布，则多样本之间比较使用方差分析，组间对比用LSD-t检验，若不符合正态分布，则用非参数检验，P＜0.05为数据差异具有统计学意义。

结 果

1 各组处理对肾上腺素诱导的心律失常模型家兔心电图影响的比较

与模型组进行对比发现，早搏灵胶囊组和普萘洛尔组能明显推迟家兔室性心律失常出现时间，缩短家兔室性心律失常持续时间，具有显著性差异（P＜0.05）；早搏灵胶囊组与普萘洛尔组在缩短家兔室性心律失常持续时间上无明显差异（P＞0.05），但其延迟家兔室性心律失常出现时间的作用低于普萘洛尔组，具有显著性差异（P＜0.05）。见表 1。

表1 各组处理对肾上腺素诱导的心律失常模型家兔心电图影响的比较（）

表1 各组处理对肾上腺素诱导的心律失常模型家兔心电图影响的比较（）

注：与模型组比较，*P＜0.05；与普萘洛尔组比较，#P＜0.05。

组别 动物只数 室性心律失常出现时间/s室性心律失常持续时间/s空白组 8 — —模型组 8 16.09±6.02 117.00±33.50普萘洛尔组 8 32.56±9.06* 81.26±21.19*早搏灵胶囊组 8 23.46±6.28*# 85.20±20.12*

2 各组家兔心肌组织钠钾ATP酶（Na+ -K+ ATPase）活性比较

与空白组比较，模型组家兔的钠钾ATP酶活性降低，有极显著性差异（P＜0.01）；与空白组比较，早搏灵胶囊组、普萘洛尔组的家兔钠钾ATP酶活性降低，均有显著差异（P＜0.05）。与模型组比较，早搏灵胶囊组、普萘洛尔组两组家兔钠钾ATP酶活性明显增高，均有显著性差异（P＜0.05）；与普萘洛尔组相比，早搏灵胶囊组家兔的钠钾ATP酶活性低于普萘洛尔组，有显著性差异（P＜0.05）。以上说明，早搏灵胶囊组与普萘洛尔均可提高心律失常家兔钠钾ATP酶活性，普萘洛尔组优于早搏灵胶囊组。见表2。

表2 各组家兔心肌组织钠钾ATP酶（Na+-K+ATPase）活性比较（）

表2 各组家兔心肌组织钠钾ATP酶（Na+-K+ATPase）活性比较（）

注：与空白组组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05；与普萘洛尔组比较，·P＜0.05。

组别 动物只数 Na+-K+ATPase活性（μmolPi/mgprot/h）空白组 8 4.12±0.94模型组 8 2.89±0.58*普萘洛尔组 8 3.76±0.47*△早搏灵胶囊组 8 3.31±0.66*△·

讨 论

从中医角度来讲，室性心律失常归属于中医“心悸”领域，心悸的病机多为虚实夹杂，多由于素体虚弱、情志不遂、饮食不节以及感受外邪，导致人体内气血不足、阴阳失衡，心脉运行不畅，心神失养而发病[3]。临床上心悸患者症候多为虚实夹杂的表现，并非单一证型。心悸日久，易耗气伤阴，气血运行不畅，而致血行瘀滞。早搏灵胶囊主要适用于临床上气阴两虚兼有瘀血内停的患者。组方中以红参为君，黄芪、麦冬为臣，君臣配伍，补润结合，以达益气养阴之效，又加之当归、苦参、丹参等药以行血活血，共奏荣心血、养心阴、行心血而不瘀滞之效，从而全方位调节，达到标本兼治的目的。通过前期临床观察，本药物可以显著提高患者的生活质量，降低患者的心律失常的发生率，未产生不良反应[4]。

心脏的节律收缩与传导有赖于心肌细胞膜内外的离子分布稳态，离子分布紊乱则会导致心律失常的发生。钠钾ATP酶是镶嵌在动物膜上维持细胞膜内外离子浓度稳态的重要蛋白质，它通过消耗ATP，可以向细胞外泵出3个钠离子，向细胞内泵进2个钾离子，它具有三个亚基单位，分为α、β、γ亚单位。其中α亚单位起到泵的主要作用[5]。当心肌组织钠钾ATP酶活性降低时，“入钾排钠”的工作效率降低，导致细胞内钠离子增多，钾离子减少，胞内钙离子过多，使心肌细胞的自律性增高，传导速度减缓，从而导致心律失常的发生[6]。实验所用的造模药物肾上腺素是一种重要的儿茶酚胺类神经递质，以其造模可诱导家兔产生类似于临床上交感神经兴奋导致的室性心律失常[7]。肾上腺素通过作用于心肌细胞的β肾上腺素能受体，使β肾上腺素能受体激活，激活的β受体则会与心肌细胞膜上的钠钾泵α1亚基偶联，使α1亚基从胞浆膜上转移到细胞内，导致钠钾ATP酶活性降低[8]，从而引发一系列反应，导致家兔发生室性心律失常。

早搏灵胶囊的君药红参中的有效成份，可以改善细胞的能量代谢，对于心、脾等相关组织的钠钾ATP酶有不同程度的激活作用，对镁ATP酶产生抑制作用[9]；臣药黄芪可以正向保护心肌细胞钠钾ATP酶的活性，对钠、钾电子流起到调控作用，实现正性肌力作用[10]；黄芩的主要成份黄芩甙可以通过提高钠钾ATP酶活性抑制哇巴因所致的心律失常[11]。其他组成药物虽没有直接对钠钾ATP酶产生调节作用，但是研究发现它们可以对心脏电生理产生不同程度的影响。当归对钙通道有一定的阻滞效果，同时也可以抑制钠离子向胞内流动和钾离子向胞外流出[12]；红参、苦参、丹参酮均可以不同程度地抑制心肌细胞膜上的离子电流[13-15]，并且丹参有较好的抗室性心律失常的作用[16]；麦冬、青皮可以提高心肌收缩力，有效抵抗心律失常[17-18]；山楂可有效抑制心肌细胞内钾离子外流，可以产生类似于Ⅲ类抗心律失常药物的作用[19]。组方中药物之间的相互配伍，也可提高抗心律失常的作用。黄芪和当归作为益气补血的药对，两者配伍可增强药理作用，提高对心肌细胞的正向保护作用[20]，亦可能提高黄芪对于钠钾泵的活性的保护。麦冬与红参合用后可以加强对于心肌电生理的影响，提高抗心律失常的疗效[21]。这些都为早搏灵胶囊可以提高钠钾泵的活性以及抗心律失常的作用提供了可靠的理论依据。

本实验通过对家兔心电图时相变化的观察记录，发现早搏灵胶囊可以有效延迟肾上腺素诱导的家兔的室性心律失常出现时间，缩短家兔的室性心律失常持续时间；显著提高家兔的心肌组织钠钾ATP酶的活性，验证了上文观点。由此可以推测出早搏灵胶囊可以通过上调钠钾ATP酶活性，调节心肌细胞膜内外Na+、K+分布，维持心肌细胞膜内外离子的分布稳定，这可能早搏灵胶囊对抗肾上腺素诱导的室性心律失常的作用机制之一。