彭莎 姚楠 卢岩岩 许学猛，2△ 吴淮，2 刘文刚，2 黄雪君 陈国材

膝骨关节炎(KOA)是一种以软骨退变为主要特征的骨退行性疾病，而软骨细胞自噬水平降低是软骨退变的主要原因[1-2]。维持软骨细胞一定的自噬水平可减缓软骨退变，是软骨细胞生存的重要方式[1-2]。目前中医药治疗KOA已受到广泛关注[3-4]。补肾强筋胶囊临床运用逾18 a，临床报道和实验研究均表明其对KOA具有一定的疗效[5-10]。本研究拟以KOA大鼠为研究对象，从软骨自噬角度探讨补肾强筋胶囊治疗KOA的作用机制，为补肾强筋胶囊临床治疗 KOA 提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

40只SPF级SD大鼠，雌雄各半，体质量180～220 g，购自广东省医学实验动物中心，生产许可证号为SCXK(粤)2018-0002。动物实验环境：广东省第二中医院(广东省中医药工程技术研究院)SPF级动物实验室，设施使用许可证号为SYXK(粤)2015-0059。

1.2 实验药物和试剂

补肾强筋胶囊(批准文号为粤药制字Z20071352，批号为20180801，药物组成：杜仲、补骨脂、骨碎补、熟地黄、血竭、全蝎等)由广东省第二中医院制剂室提供；木瓜蛋白酶(美国Sigma公司，批号为SLBR9817V)；半胱氨酸(美国Sigma公司，批号为BCBN4306V)；大鼠白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(天津安诺瑞康生物技术有限公司，批号分别为370180831，569181010)；4%组织细胞固定液(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司，批号为893001335)；Trigol试剂(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司，批号为99G00127)；RevertAid Reverse Transcriptase(美国Thermo Fisher Scientific公司，批号为00366374)；SYBR Premix Ex Taq Ⅱ (Tli RNaseH Plus)(大连宝生物工程有限公司，批号AHX0051N)；ddH2O(北京天根生化科技有限公司，批号R6305)；苏木精-伊红(HE)染液(广州优迪生物科技有限公司，批号为0314A20)；……