杨光露 郭杨△ 马勇 涂鹏程 孙杰 许炜民 吴承杰

椎间盘退行性病变(Intervertebral Disc Degeneration，IDD)是腰椎间盘突出症、盘源性腰痛等骨科常见疾病发生发展的重要病理过程[1-2]，一般多发于中老年人[3]，但随着互联网应用的普及和生活节奏的加快，IDD越来越多在中青年人群中发现，加重了社会经济负担[4]。研究表明IDD的进展受到多种因素如椎体力学失衡、炎症、代谢疾病等的影响[5-8]。退变椎间盘在炎性因子及降解酶(如白细胞介素1(Interleukin-1，IL-1)、基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinase，MMP)等)的浸润下，使二型胶原(Collagen Ⅱ，COL2A1)、蛋白多糖(Aggrecan)等髓核基质大分子分解增加，最终造成椎间盘基质的生物力学特性不断丧失[9-12]。因此抑制炎性因子及降解酶的生成，促进基质合成对改善IDD尤为重要。

1 材料与方法

1.1 实验动物

成年健康SPF(无特定病原体)级SD大鼠60只，雌雄各半，体质量180～220 g，由南京青龙山动物中心提供，动物许可证号SCXK(浙)2019-0002。

1.2 实验药物及试剂

扶阳宣痹汤，国家发明专利ZL201711188654.1。组合：黄芪30 g，桂枝30 g，白芍30 g，附子12 g，薏苡仁12 g，甘草10 g，干姜6 g等。饮片购自南京中医药大学附属医院药剂科。腰痹通胶囊(中国康缘公司，401206)；苏木精-伊红(HE)染色液(中国雷根公司，DH0006)；MMP9、MMP13、GAPDH抗体(美国Proteintech公司，10375-2-AP，18165-1-AP，10494-1-AP)；Aggrecan及COL2A1抗体、羊抗兔二抗(美国Abcam公司，ab36861，ab188570，ab205718)；ReverTraAce qPCR反转录试剂盒、SYBR Green Realtime PCR Master Mix定量试剂盒(日本TaKaRa公司，批号RR036A及RR820A)。

1.3 实验仪器

PharmaScan 7.0T小动物磁共振成像系统(德国Bruker公司)；PerkinElmer酶标仪(美国Bio-Tek公司)，聚合酶链式反应(PCR)自动系列化分析仪(美国ABI公司)，化学发光成像仪(美国GE Healthcare公司)，蛋白半干转印仪及电泳仪(美国Bio-Bad公司)，微孔板离心机及各量程移液器(德国Eppendorf公司)，生物显微镜-图像分析系统(德国Leica公司)，全自动硬组织切片机(德国Leica公司)。……