姚莎莎，盘如刚，甘春芳

0引言

青光眼是常见的致盲眼病，目前主要采用青光眼滤过手术治疗[1]。但手术操作会促进手术周围组织中成纤维细胞的增生，致使滤过通道闭合，导致青光眼滤过手术失败，据统计青光眼滤过手术2a后失败率高达20%[2-3]。目前，常用抗代谢药物抑制青光眼滤过术后手术周围组织的自我修复，但这些药物具有一定的毒副作用，因此寻找毒副作用小且高效的治疗方法和药物是目前研究的热点[4-5]。RNA干扰技术是目前较为先进的技术之一，是利用配对的小片段RNA植入细胞达到阻止同源基因表达的技术[6]。可以利用RNA干扰技术抑制成纤维细胞增生相关蛋白的表达，降低患者术后手术失败率。热休克蛋白47(heat shock protein47，HSP47)属于热休克蛋白家族，参与组织器官纤维化的生理病理过程[7]。近年来研究发现，相较于正常人群，胶原异常增生性疾病患者的HSP47阳性表达水平异常升高，如病理性瘢痕、梭形细胞脂肪瘤等[8]。而青光眼滤过手术后Tenon囊的愈合与病理性瘢痕有极大的相似之处，因此，推测HSP47与青光眼滤过手术后Tenon囊的愈合有着一定的关联。本文将探究HSP47 siRNA对体外培养人眼Tenon囊成纤维(HTCF)细胞生物学行为及TGF-β1表达水平影响，以期为临床防控青光眼滤过手术治疗失败提供实验数据。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1主要细胞人眼Tenon囊成纤维细胞购自中国科学院细胞库。

1.1.2主要试剂与仪器Lipofectamine 2000(货号：11668-027，批号：062018)购自美国Invitrogen；Trizol试剂(货号：15596026，批号：18T1905)购自美国Sigma；Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒购自杭州四季青生物工程材料有限公司；……