吕惠楠，魏建华，刘林德*，张 莉，孙 杰，刘志浩，孔宪海

（1.鲁东大学生命科学学院，山东烟台 264025；2.烟台三维岩土工程技术有限公司，山东烟台 264002）

牡丹（Paeonia suffruticosa）为芍药科（Paeoniaceae）芍药属（Paeonia）植物，又名富贵花等，为多年生落叶灌木［1］。牡丹在西周时期就已经被应用、栽培和观赏，我国也是牡丹全球种植面积最广和品种最齐全的国家［2］。

菏泽牡丹属于中原牡丹，观赏价值高，为我国目前主栽品种［3］。关于菏泽牡丹的传粉生态学研究未见报道，基于此，对生长在菏泽地区和生长在烟台地区的牡丹分别进行传粉生态学特性比较研究，以期对菏泽牡丹的栽培育种、异地栽培、花期控制等提供更加详尽合理的理论指导。

1 材料与方法

1.1 研究地点概况

本研究分别在菏泽的牡丹园与烟台的鲁东大学牡丹园内进行，后者由鲁东大学菏泽校友在2010 年兴建，牡丹引自菏泽。因为气候原因，鲁东大学牡丹园内的菏泽牡丹开花时间较菏泽地区晚10 d 左右。

1.2 试剂与仪器

联苯胺，购自酷尔化学科技（北京）有限公司；红四氮唑，购自天津市福晨化学试剂有限公司。

日立TM-1000 扫描电镜（SEM）、相机（HDRCX390E）。

1.3 研究方法

1.3.1 花粉活力检测

牡丹花粉活力的检测采用TTC 法测［4］。使用10%蔗糖溶液配制0.5%TTC 溶液，将花朵散粉后不同天数（1～7 d）的花粉置于载玻片上，取TTC 溶液滴于花粉处，盖上玻片，放在内置湿滤纸的平皿中，37 ℃遮光环境下2 h 后显微镜观察并统计变红花粉的百分比。

1.3.2 柱头可授性检测

使用联苯胺-过氧化氢法测定牡丹柱头可授性［5］。使用1% 联苯胺、3% 过氧化氢与水配制体积比为4 ∶11 ∶22 的反应液，取两地不同时期的花朵，用刀片切下柱头，将其浸入反应液中。……