王晶晶，陈书强，董 杰，邸 曼，王晓红

体外受精和胚胎移植辅助生殖技术(assisted reproductive technology, ART)是通过对配子及早期胚胎进行体外操作，以达到辅助不孕不育夫妇获得妊娠的一系列技术[1]。然而，其安全性也引起生殖医学专家的极大关注。研究显示，与自然妊娠相比，ART子代出现早产、低出生体质量儿、出生缺陷等不良妊娠结局的风险显著增加[2]。胎盘作为孕期特有器官，不仅是母胎营养转运的纽带，还在维持正常妊娠过程中发挥重要的生理作用[3]。多项研究表明，ART子代胎盘出现结构和功能异常，与胎儿生长受限等密切相关[4-6]。热休克蛋白70(HSP70)是热休克蛋白家族中最保守的一种细胞内分子伴侣，可以参与蛋白质的折叠、促进蛋白质泛素化和蛋白酶降解，在保护细胞免受各种外界应激方面发挥着关键作用[7-9]。核转录因子-κB(NF-κB)是1986年首次发现的一种关键性转录因子，几乎存在于所有类型细胞的胞质中，对免疫细胞活化、应激反应、细胞凋亡等具有调节作用[10-11]。本研究拟采用实时逆转录荧光定量聚合酶链式反应及免疫印迹法检测ART和自然妊娠子代胎盘中HSP70与NF-κB的表达情况，并探讨二者变化与ART不良妊娠结局发生风险增加的相关机制。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年6月—2019年6月在我院产科分娩的ART子代(ART组)和同期自然妊娠分娩的子代(对照组)作为研究对象。ART组纳入标准：产妇年龄<35周岁，单胎妊娠,新生儿既往产检正常且无出生缺陷,父母双方染色体正常；排除标准：产妇孕前合并严重的内外科并发症(如严重的高血压病、糖尿病、甲状腺疾病等),行胚胎冷冻移植者,行体外受精或接受胚胎植入前遗传学诊断者。对照组为自然妊娠分娩的子代，纳入标准与ART组相同，排除孕前合并严重内外科并发症者。2组进行年龄、孕周、产前体质量指数(BMI)配对，以消除偏移，最终共纳入ART组46例(体外受精-胚胎移植41例、卵胞浆内单精子注射5例)，对照组65例。本研究经我院伦理委员会批准。

1.2研究方法

1.2.1标本采集：胎盘娩出后，2组各选取20例胎盘，立刻称重，并剪取脐带附着部位的胎盘小叶组织2 cm×2 cm×2 cm，去除母体蜕膜后将胎盘绒毛置于4℃预冷0.9%氯化钠注射液中，漂洗多次至无血迹，分装到冷冻管后立刻置于液氮中冻存1 h，最后转移至-80℃超低温冰箱中保存待用。……