郭 松，陈正阳，杨佳启，柴韶斌，徐冰心，孙宏伟，周金莲，杨鹤鸣，崔 彦

外太空是一个集失重、辐射、高磁场、超低温等因素的复杂环境，充斥着威胁航天员生命与健康的不稳定因素。随着载人航天事业的飞速发展，微重力环境对机体的影响备受关注[1-2]。研究证实，微重力环境会对消化系统产生一系列不良影响，包括对消化液和消化道激素分泌、胃肠黏膜屏障、肠道微生态、胃肠道血液及淋巴循环、药物动力学、药物效应动力学及对肝脏、胰腺功能的影响等。保障航天员在执行航天任务及进行模拟微重力环境训练过程中消化系统的稳定状态，明确微重力环境对消化系统影响的机制，均亟待深入研究[3-4]。本课题在前期研究[5-7]的基础上，应用旋转式细胞培养系统(rotary cell culture system， RCCS)，研究模拟微重力环境对人胃黏膜上皮GES-1细胞代谢组学的影响，以期为未来基于微重力环境下代谢组学变化特征探讨胃黏膜上皮相关疾病的发生发展机制及应对措施提供理论基础。

1 材料与方法

1.1主要材料和仪器 人胃黏膜上皮GES-1细胞系(赛百慷生物技术股份有限公司)，RCCS(Synthecon，USA)，10 ml高截面纵横比容器-D410(Synthecon，USA)，Cytodex-3微载体(Sigma，USA)，TCP-SP5-Ⅱ激光共聚焦显微镜(Leica Microsystems，Wetzlar，GER)，超高效液相色谱串联飞行时间质谱仪(AB SCIEX，USA)。

1.2GES-1细胞培养和实验分组 配制含10%胎牛血清，1%青霉素100 U/ml和链霉素100 mg/ml的DMEM培养基，选取3～10代处于对数生长期的人胃黏膜上皮GES-1细胞进行培养。将培养后的人胃黏膜上皮GES-1细胞随机分为模拟微重力组(SMG组)和正常重力对照组(NG组)。

1.3RCCS模拟微重力细胞培养 将人胃黏膜上皮GES-1细胞以1×106个/ml密度与经磷酸缓冲盐溶液(PBS)、75%乙醇预处理的Cytodex-3微载体0.05 g混合，置入高截面纵横比容器-D410并连接RCCS。……