李 静， 尉 娜， 刘亚美， 苏 静， 宋景贵

（1新乡医学院第三附属医院神经内科，河南新乡453000；2新乡医学院第一附属医院神经内科，河南卫辉453100；3新乡医学院第二附属医院神经内科，河南新乡453002）

脑卒中后抑郁（post stroke depression，PSD）是脑卒中中一种常见神经精神并发症[1]，目前发病机制尚未明确，可能包括生物学和心理学等多方面因素[2]。随着抑郁症细胞因子假说的提出，研究认为，抑郁可能与免疫学缺陷有关[3-4]。辅助性T 细胞（help T cell，Th）和调节性T 细胞（regulatory T cell，Treg）均是CD4+T 细胞不同亚群，Th17 细胞可特异性分泌细胞炎症因子，诱导炎症反应及自身免疫性疾病，而Treg 细胞具有免疫抑制作用，可维持自身免疫耐受，Th17/Treg比例失衡与抑郁症、卒中后疲劳等疾病密切相关[5-6]。Notch 信号通路不仅与细胞增殖分化凋亡有关，还具有免疫调节功能。研究证实，γ-分泌酶抑制剂DAPT｛N-[N-（3，5-difluorophenylacetyl）-L-alanyl]-S-phenylglycinet-butyl ester｝是Notch 信 号通路有效阻断剂，在慢性丙型肝炎和过敏性哮喘等疾病中发挥调节Th17/Treg 平衡的作用[7-8]，但DAPT是否亦通过阻断Notch 信号通路调控Th17/Treg 平衡而参与PSD 尚未可知。因此，本研究拟通过建立PSD 大鼠模型，探究DAPT 调控Th17/Treg 平衡参与PSD 的作用机制，以期为阐明PSD 发生机制提供参考资料。

材料和方法

1 实验动物

健康清洁级雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠33只，7 周龄，体重220～250 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，生产许可证号：SCXK（京）2016-0007。大鼠于12 h/12 h 光照/黑暗、室温（22±2）℃环境中饲养，自由饮食、饮水。

2 药物和试剂

大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）线栓（型号：403556PK5Re）购自Doccol；DAPT（货号：D5942，HPLC≥98%）购自Sigma-Aldrich；RNA 提取试剂盒（货号：DP419）购自天根生化科技（北京）有限公司；实时荧光定量PCR（realtime quantitative PCR，RT-qPCR）试剂盒（货号：D7268S）购自上海碧云天生物科技有限公司；……