Axin2在胰腺癌细胞中的表达及临床意义分析
2021-04-03黄深巧凌梦舒玲张少华
保健文汇 2021年2期
文/黄深巧,凌梦,舒玲,张少华
对于胰腺癌而言,其是十分普遍的消化系统性肿瘤,对患者的生命带来了极大的威胁[1]。因为在早期缺少相应的诊断方式,所以,许多胰腺癌患者在明确诊断后,已经至晚期,丧失了进行手术的机会,所以,临床中对胰腺癌发生、进展有关的分子机制进行分析与研究,并找出在早期能够评判诊断、预后的指标均是十分关键的。本研究分析并研究了Axin2在胰腺癌细胞中的表达。
1 对象及方法
1.1 对象
对具有较低表达Axin2中的人胰腺癌(PANC-1)细胞进行分组,即为空白对照组、阴性对照组、过表达组,对空白对照组没有进行转染,对阴性对照组、过表达组就空质粒、过表达Axin2质粒进行转染(具体图1)。
1.2 方式
1.2.1 细胞培养与转染
借助具有10%的胎牛血清的DMEM对BxPC-3、PANC-1、Mia PaCa-2进行培养;借助具有各类细胞因子的KSFM型培养基对H6C7进行培养。间隔2d进行一次换液,在得到70%-80%的融合后,借助胰蛋白酶消化传代进行之后的各项实验。
1.2.2 QPCR
对细胞的总核糖核酸(RNA)进行提取,借助紫外分光光度计对吸光值进行检测,以分析并研究RNA的总纯度。借助1.5%的琼脂糖电泳对RNA本身的完整性进行检测。反应条件设定好在95℃,共10min,接着,95℃,共10s,60℃,共50s,进行40个循环。处于酶链聚合反应(PCR)仪中进行相应的反应,在完成后,借助相配的软件对其进行研究与分析,得到产物的电子计算机断层扫描(CT)值。借助2-△△ct值以对Axin2进行表示。
1.3 观察指标
比较各个细胞株中Axin2表达、过表达质粒转染后QPCR检测到Axin2表达、Axin2过表达对于PANC-1细胞增殖、细胞迁移、细胞侵袭影响。……
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