沉默ELAVL1基因表达体外和体内抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖
2021-04-02周逢海吕海迪张晓峰
周逢海,吕海迪,周 川,张晓峰,张 发
胚胎致死性异常视觉(embryonic lethal abnormal vision,ELAV)家族成员中的人抗原R(human antigen R,HuR)即为ELAVL1蛋白,其是一种RNA结合蛋白,在正常细胞中主要分布于细胞核中,当其从细胞核转移至细胞质中时即能够与mRNA结合促进目的蛋白的表达[1]。HuR广泛表达于包括小肠、脾脏和卵巢等组织中,通过转录后机制参与细胞中许多分子的调控表达[2]。然而,其他家族成员HuB、HuC和HuD几乎只表达在神经组织中,参与相关分子的表达调控[2]。
研究表明,ELAVL1基因与肿瘤的多种生物学行为有关;与癌旁组织或正常组织相比,ELAVL1在结直肠癌、肺癌、乳腺癌和肝癌等多种肿瘤组织中高表达,且主要表达于细胞质中[2-7]。ELAVL1通过与肿瘤生物学功能有关的多种分子的mRNA相结合从而促进蛋白表达,进而影响肿瘤细胞多种生物学功能包括细胞增殖、周期、凋亡和侵袭等,甚至还与肿瘤细胞的放化疗耐受相关,最终导致肿瘤的发生和进展[2-7]。然而,当前有关ELAVL1在前列腺癌中的表达及作用鲜有报道。已有的研究同样发现,与正常前列腺组织相比,ELAVL1在前列腺癌组织中高表达且主要表达于细胞质中[8],初步研究表明高表达的ELAVL1与前列腺癌的发生和发展密切相关,但机制如何仍缺乏深入的研究。
本研究中将携带有特异性针对ELAVL1基因的ELAVL1-shRNA(shELAVL1)重组腺病毒载体导入前列腺癌PC-3细胞内从而实现ELAVL1 mRNA和蛋白的特异性沉默,并在此基础上通过检测细胞增殖能力及细胞周期,从而观察ELAVL1对PC-3细胞生长的作用;之后通过检测与上述生物学作用……
