宋超，王冶，蒲劲松，陈林，郭浩然，崔瀚文

(川北医学院附属医院 骨科，南充 637000)

骨关节炎(osteoarthritis，OA)是一种慢性退行性关节疾病，关节软骨降解、软骨下骨硬化、滑膜炎以及骨赘形成是OA常见的病理特征。OA频繁地发生于老龄人群中，可导致患者关节疼痛、功能失调、残疾[1-2]。尽管如今已发展出诸如药物治疗、针灸疗法、电磁治疗、干细胞疗法等治疗方式，但OA依然难以彻底治愈[3-4]。转移相关肺腺癌转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT1)最早发现于与非小细胞肺癌患者生存相关的转录产物筛选，研究发现其与许多人类疾病有着密切关系[5]。Liang等[6]研究发现，MALAT1/miR-127-5p可调控骨桥素介导的软骨细胞增殖，从而对OA起调控作用。尽管有文献报道在急性肾损伤中MALAT1与miR-146a存在相互作用[7]，但MALAT1和miR-146a是否参与了对OA的调控尚未见报道。本研究通过培养人软骨细胞株CHON-001，并经过miR-146a或MALAT1重组过表达载体转染以及IL-1β处理，探究MALAT1/miR-146a对软骨细胞凋亡及细胞外基质降解的作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 临床样本获取 从川北医学院附属医院接受了全膝关节置换手术的OA患者身上获取OA关节软骨组织20例，从接受了截肢手术的非OA患者身上获取普通关节软骨组织20例，所有软骨组织的获取均遵照中国骨科学会骨关节炎研究医学会的诊断标准，组织样本经手术摘取后立即通过液氮速冻保存。本研究得到了医院伦理委员会的支持以及患者本人的知情同意。

1.1.2 主要试剂 DMEM培养液、FCS购自美国Gibco公司，IL-1β购自美国Sigma公司，CCK-8试剂盒、Hoechst试剂盒、BCA蛋白定量试剂盒购自上海……