车楠，齐文博，杨昭婷，玄延花*

1延边大学医学院再生医学研究所，吉林延吉 133002；2延边大学医学院病理教研室，吉林延吉 133002

胃癌是全球范围内最为常见的恶性肿瘤之一，也是我国癌症相关死亡的第二大疾病。据报道，2018年全球胃癌新发病例超过10万，死亡约7.8万例[1]。 尽管胃癌的治疗手段在不断更新[2-3]，但由于原发性或获得性耐药，晚期胃癌患者5年生存率低于20%[4]。因此，探索新的分子生物标志物以预测胃癌进展并辅助靶向治疗成为主要的研究方向。肿瘤干细胞(cancer stem cells，CSCs)是具有自我更新和分化潜能的细胞亚群，参与肿瘤的起始、侵袭、转移和化疗耐药，是肿瘤治疗的新靶点。作为B7家族成员之一，B7-H4是T细胞免疫应答的负性调控因子，但在多种癌症(如肺癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌)中高表达，且与癌症进展及患者预后密切相关[5-7]。目前，关于B7-H4表达与胃癌临床病理特征及干性特征关系的研究报道较少。本研究旨在结合生物信息学分析方法，利用胃癌标本和胃癌细胞，探讨B7-H4在胃癌中的临床意义及其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1临床组织标本 附有随访信息的183份胃癌组织样本来源于上海芯超生物科技有限公司。胃癌病例中男112例，女71例，术前未接受任何治疗，随访期2～136个月。3份人胚胎组织样本来源于延边大学医学院。本研究通过延边大学医学院伦理委员会审批(BS-13-35)。

1.2细胞及主要试剂、仪器 人胃癌细胞AGS、SNU484、MKN74、MKN28购自美国ATCC(American Type Culture Collection)细胞库。B7-H4、CD105、SOX9、LSD1、CD133和β-actin抗体购自英国Abcam公司；p16、p-PI3K-p85、p-Akt(Ser473和Thr308)及NF-κB p65抗体购自美国Millipore公司；免疫组化试剂盒、BCA蛋白检测试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司。……