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褐藻胶裂解酶在枯草芽胞杆菌中的重组表达及催化特性研究

2021-03-31李星霖徐翊文龚劲松徐国强史劲松许正宏

微生物学杂志 2021年6期

李星霖,吴 雯,徐翊文,李 恒,龚劲松,徐国强,4,史劲松,许正宏,4*

(1.江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122;2.江南大学 生命科学与健康工程学院,江苏 无锡 214122;3.江南大学 糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122;4.江南大学 粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心,江苏 无锡 214122)

褐藻胶裂解酶是降解褐藻胶的一种重要工具酶[1-2],其降解产物褐藻寡糖具有广泛的生理活性,包括调节血糖与血脂、抑制肿瘤、促进细胞因子分泌[3],以及促进植物萌发与生长[4-5]等。此外,褐藻胶裂解酶本身也具有特殊的应用价值[6],可以和抗生素联用治疗铜绿假单胞菌导致的囊胞性纤维症[7],也可与纤维素酶[8]联合使用获取海带原生质体进行分子育种。伴随基因工程技术的发展,有关褐藻胶裂解酶的研究已由最初集中于产酶微生物的分离,发展为利用模式表达体系进行工程菌的构建,可在实现酶高效表达的同时,简化后续酶应用过程中的产物分离等环节。鉴于大肠埃希菌体系在食品与药品中的应用受到较多限制,表达水平高且安全的枯草芽胞杆菌是酶的优选表达载体,广泛应用于各种食品用酶的外源表达。已报道的产褐藻胶裂解酶的芽胞杆菌大多从自然界中直接分离得到,如从威海海产养殖场腐烂海带中筛得的Bacillussp.Alg07等[9-10]。但野生枯草芽胞杆菌产酶酶活普遍较低,如从土壤中得到的产褐藻胶裂解酶的枯草芽胞杆菌经发酵优化后的酶活仅18.79 U/mL[11]。利用枯草芽胞……

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