程凤，张庆霞，陈成建，李万婷，张家榕，张更谦，严江伟

1.山西医科大学法医学院，山西 太原030001；2.北京市公安司法鉴定中心，北京100192

线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）与核DNA 相比，由于较高的拷贝数量，检测样本的需求量低，对降解的现场生物检材，如毛发、陈旧尸骨、指甲等样本的检测具有优势[1]。但目前绝大多数情况下仅对mtDNA 高变区Ⅰ和mtDNA 高变区Ⅱ进行双脱氧链终止法（dideoxy chain-termination method）检测，由于所检测突变位点的数量有限，使其难以准确将无关个体进行区分[2]。随着测序技术的不断发展，以规模化平行测序为主的二代测序技术逐渐应用于法庭科学领域[3]。

由于二代测序技术具有可对mtDNA 进行多样本多位点同时检测的优势[4]，使mtDNA 个体识别能力得到一定的提高[5]。本研究使用Precision ID mtDNA Whole Genome Panel试剂盒（美国Thermo Fisher Scientific 公司）[6]对线粒体全基因组进行扩增，应用HID Ion GeneStudioTMS5 测序系统（美国Thermo Fisher Scientific 公司）对线粒体全基因组分析检测，并对其分型结果进行探讨，为法庭科学的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 样本收集

按照“知情同意”原则，分别采集8 名汉族无关个体的口腔拭子，静脉血及额、顶、颞部、会阴部毛发样本各1 份，每份毛发样本包含2 根毛发。样本总共为48 份。

1.2 样本处理

将口腔拭子和静脉血涂卡后室温放置，晾干后常温储存。对毛发样本使用以下步骤进行处理[7]。首先，剪取距离毛根2 cm 处长度为2 cm 毛干样本，使用200 μL 1%十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate，SDS）溶液浸泡，以离心半径10 cm，1 000 r/min，离心5 min，弃去上清液。加入200 μL 纯水浸泡，以离心半径10 cm，1 000 r/min，离心5 min，弃去上清液。再使用400 μL 无水乙醇浸泡10 min 后弃去所有上清液，晾干后常温储存。……