死后血浆和溶血样本中IgE的稳定性
2021-03-30王天琦王天方贾宇晴曹志鹏朱宝利
王天琦,王天方,贾宇晴,曹志鹏,朱宝利
1.中国医科大学法医学院,辽宁 沈阳110122;2.天津市公安局河西分局物证鉴定所,天津300061
过敏性休克死亡是法医学鉴定的重要内容之一,由于缺乏特异性的病理形态学改变,导致此类案件的法医学鉴定具有一定难度[1]。过敏性休克主要由Ⅰ型超敏反应介导,免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)是介导Ⅰ型超敏反应的关键介质[2]。在既往研究报道[3]中已证实,死后血清IgE 的检测对过敏性休克的死因诊断具有辅助作用并已在实际工作中得到一定的应用。
在实际工作中,由于样本的送检、移交或检测不及时等因素造成样本需暂时保存,一般为冷冻保存,有时还需长期保存以备检。临床研究[4-5]结果表明,IgE 在正确采集下可以保存数周,在有抗凝剂的作用下可以室温保存11 周且维持其结构稳定不被降解,在-20 ℃条件下可稳定保存6 个月。动物实验[6]结果显示,大鼠死后血清IgE 在冷冻、室温及4 ℃条件下可稳定保存25 d。但在法医学实践中,尸体冷冻保存及死后变化常导致严重溶血,因此,探究IgE 在死后样本中的稳定性用于指导实际工作是很有必要的。
本研究拟收集死亡案例的血浆及溶血样本,对IgE 经-20 ℃、4 ℃、25 ℃3 种条件下保存、5 次反复冻融后及-80℃长期超低温冷冻保存后的稳定性进行初步探究。
1 材料与方法
1.1 样本来源及选取标准
本研究共选取39 例中国医科大学司法鉴定中心在2017—2018 年受理的非冷冻且死后48 h 内进行尸体解剖案例的心血样本,其中20 例在获取血液后立即以3 000×g离心20 min 获得血浆,血浆性状为无肉眼可见溶血,另外19 例血液在获取后用超声破碎法(500 W,20 kHz,5 min)致其溶血,制备成溶血样本。……
