白坤宏 向婷 赵敏越 卜雯卿 程政 王菲

[关键词]炎症环境;振动;牙周膜干细胞;成骨分化;牙周病;蛋白水平

牙周病是我国发病率最高的口腔慢性疾病之一，长期的牙周病可以造成牙周支持组织的损伤、缺失，包括牙龈红肿出血、牙龈退缩、牙槽骨吸收等，最终导致牙齿松动、脱落[1]。牙周支持组织的自身修复能力较弱，并且持续处于炎症微环境之中，使得丧失的牙周支持组织难以再生。牙周组织工程技术为牙周缺损开辟了新的治疗途径。牙周膜干细胞（Periodontal ligament stem cells，PDLSCs）相较其他干细胞表现出更强的牙槽骨、牙周韧带重建能力，被认为是最理想的牙周组织工程种子细胞[2]。

低强度高频振动（Low magnitude high frequencyvibration，LMHFV）是一种新颖的机械力学辅助疗法，以其非药物性、非侵入性的优势，被应用于肥胖、骨质疏松、肌肉疲劳、骨折等疾病的临床研究与康复治疗之中，并且取得了不错的效果[ 3 - 5 ];在干细胞研究领域也有学者证实LMHFV对骨髓间充质干细胞（Bone m a r r o wmesenchymal stem cells，BMSCs）、PDLSCs的增殖、分化有相应的作用[6-7]。目前尚无LMHFV在炎性条件下对PDLSCs成骨性能影响的相关报道，所以本课题组就LMHFV在炎性条件下对PDLSCs成骨分化能力的作用展开探索，为今后将LMHFV应用于牙周组织工程技术奠定理论基础。

1 材料和方法

1.1 实验材料：αMEM培养基（Hyclone，美国）;胎牛血清（Gibco，美国）;Ⅰ型胶原酶、中性蛋白酶、青霉素-链霉素-两性霉素B混合溶液（索莱宝，北京）;重组人TNF-α、重组人IL-1β（PeproTech，美国）;β甘油磷酸钠、地塞米松、抗坏血酸、Trizol Regent（Invitrogen，美国）;PrimeScriptTM RT-PCR kit 反转录试剂盒、Syber Green荧光定量PCR试剂盒（Takara，日本）;Z45CT垂直振动机（广州美亦丰试验设备有限公司）;CO2恒温培养箱、酶联免疫检测仪（Thermo，美国）;RealTime PCR仪（Biosytems 7500，美国）。……