李永军李兰娟

(浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,国家感染性疾病临床医学研究中心,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州 310003)

无菌动物(germ-free,GF)是指身体任何部位及生活环境中均检测不出任何活的细菌、真菌、病毒及寄生虫的动物[1]。无菌动物来源于剖腹产和胚胎移植,通过人工饲养,维护在正压无菌隔离器中的动物[2]。所有的饲料、垫料及水均经灭菌处理,检测无菌后方可传入无菌隔离器内。维持无菌动物需要严格的无菌操作技术和定期的无菌检测。由于不携带任何可检测的微生物,可排除背景微生物对实验结果的干扰,获得高重复性,高敏感度的实验结果。这种动物可以有选择性的接种多菌和单菌,来研究菌种对宿主的作用[3]。无菌动物不是绝对无菌,而是相对无菌。在现有的无菌检测技术下检测不到任何微生物[4]。

1928年到1980年,Reyniers 等[5-6]与Knight等[7]证实了哺乳动物、鸟、鱼、昆虫等可在无菌条件下饲养和维持。也是他们建立了第一代无菌大鼠和无菌小鼠。1945年美国圣母大学Lobund 实验室的Reyniers 等[5]首次培育出能连续传代的无菌大鼠,接着Gustafsson[8]也成功培育无菌大鼠。Gilbert等[9]通过去除动物中不同微生物的方法来研究其与宿主的关系。Kirk[10]对微生物与宿主的关系做了详细的阐述。

微生物的质量控制成为无菌动物培育中至关重要的技术。从过去到现在,细菌、真菌的培养和革兰染色镜检仍然是最常用的方法[11-13]。但在人工培养基上,由于条件限制,有些微生物不能生长,这就导致了无菌检测结果的不准确。……