陈妙月 丁兴红 吴素玲 陈俊松

祖国传统医学中蕲蛇又名尖吻蝮，具有驱风邪、通经络等诸多功效，被证实是治疗风湿痹证的要药，蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白（typeⅡ collagen,CⅡ）是其主要有效活性成分。胶原诱导性关节炎（collagen induced arthritis，CIA）大鼠模型是以慢性、多发性末端关节炎，甚至关节损害等为主要表现的免疫性炎症模型，被应用于关节炎病理生理、免疫机制的研究，以寻求新的治疗靶点和验证新的药物疗法[1]。本文建立CIA大鼠模型，以探讨蕲蛇CⅡ治疗CIA大鼠的相关作用机制，现将结果报道如下。

1 材料和方法

1.1 实验动物 10周龄、清洁级Wistar雄性大鼠60只，由浙江中医药大学动物实验中心提供；体重（286.5±4.3）g，饲养在标准环境中。

1.2 药物与试剂 弗氏完全佐剂，采用20 ml弗氏不完全佐剂与200 mg卡介苗（批号：200703001，上海生物制品研究所）充分混合制成；蕲蛇CⅡ，采用胰蛋白酶组合微透析等技术从蕲蛇粉末（去内脏、皮骨）中分离提取并用0.9%氯化钠溶液溶解获得20、10、5μg/ml的溶液；塞来昔布（国药准字：J20140072，辉瑞制药有限公司），按36μg/g称取药物溶解于0.9%氯化钠溶液中，获得3.5 mg/ml的溶液。Bovine TypeⅡ Collagen购自美国 Chondrex公司，FBS购自美国 Gibco公司，ConA购自上海源叶生物科技有限公司，D-Hank's液、DMEM、IL-2、IL-4、IL-17、转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）的ELISA试剂盒均购自上海碧云天生物技术有限公司，FITC标记的抗大鼠CD4抗体、PE标记的抗大鼠CD25抗体、FITC标记的抗大鼠CD4抗体、PE标记的抗大鼠IL-17A抗体均购自杭州联科生物技术股份有限公司，Percoll细胞分离液购自美国GE公司。

1.3 动物分组与处理 按随机数字表法将60只大鼠分为6组，每组10只，即高剂量组、中剂量组、低剂量组、空白组、模型组、塞来昔布（对照）组，每组10只。……