宿 放，韩佃刚，杨云庆，杨宏清，尹尚莲，张 冲，王修庚，信吉阁，艾 军

（1.云南农业大学，云南昆明 650201；2.昆明海关，云南昆明 650200；3.梁山县扶贫开发办公室，山东梁山 272600）

流行性出血热（epizootic haemorrhagic disease，EHD）是由呼肠孤病毒科（Reoviridae）环状病毒属（Orbivirus）的流行性出血热病毒（epizootic haemorrhagic disease virus，EHDV）引起的，以侵害反刍动物为主的一类虫媒性传染病[1]。EHD 广泛分布于全球的热带与亚热带地区，通过库蠓（culicoides）的吸血性叮咬传播，可感染鹿、牛、羊等多种反刍动物[2]，严重影响畜牧业发展及国际贸易。

目前在世界范围已发现了9 种血清型的EHDV（EHDV-1—EHDV-10），不同血清型病毒间缺乏交叉免疫保护，致病性也存在较大差异，因而给EHD 防控带来了极大挑战[3]。我国主要流行5 种血清型EHDV（EHDV-1、EHDV-5、EHDV-6、EHDV-7 和EHDV-10）[4-5]。不同血清型EHDV毒株间的核酸序列差异可达56.2%，同种血清型不同地域分离毒株的Seg-2核酸序列差异也可达29.4%[6-7]，表明EHDV 血清型具有高度的多样性，因而给牛羊养殖业健康发展构成严重威胁。

近年来，随着国际贸易日趋频繁以及因全球气候变暖导致的虫媒活动范围加大，EHDV 在全球呈现逐步扩散趋势，引起牛发病的报道不断增多。目前，EHD 已被世界动物卫生组织（OIE）列为须通报动物疫病[8]。检测EHDV 的方法有多种，包括抗原检测和抗体检测，但每种方法各有优劣。本文主要总结抗原检测及抗体检测方法的优缺点，以期为最适检测方法的选择提供参考。

1 抗原检测方法

1.1 病毒分离鉴定

1.1.1 细胞分离培养 从感染动物的血液、死亡动物的组织样本（脾脏、肺和淋巴结）以及库蠓中分离病毒。Aradaib 等[9]将病料接种牛肺动脉内皮、小仓鼠肾（BHK-21）和非洲绿猴肾（Vero）等细胞培养物分离出EHDV，并结合PCR 方法对分离出的病毒进行鉴定，提供了一种快速、灵敏的EHDV 的检测方法。……