吴鹏飞 王昀 秦虎 刘洋 吴金泽 王增亮

作者单位：830054 乌鲁木齐 新疆医科大学第一附属医院神经外科

脑胶质瘤是常见的原发性颅脑恶性肿瘤，手术辅助放疗或化疗是目前临床上的标准治疗策略［1-2］。然而，由于持续的肿瘤生长或细胞侵袭，导致脑胶质瘤患者的高死亡率，大多患者预后较差［3］。因此，众多学者致力于阐明其发展机制并寻找特异性的治疗靶点，以提高脑胶质瘤的治疗疗效。瞬时受体电位（transient receptor potential，TRP）通道家族包括生物跨膜蛋白，通过调节细胞质信号和细胞反应而在多种生理和病理过程中起重要作用［4］。M型顺时受体电位通道7（melastatin transient receptor potential channel 7，TRPM7）是TRP通道家族的成员，具有非选择性阳离子通道和蛋白激酶功能［5］。目前研究发现TRPM7在多种肿瘤中高表达［6-7］，且在恶性肿瘤进展中起重要作用，包括调节细胞增殖、黏附、凋亡、基因表达、细胞迁移和转移等［8-9］。上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）已被证实在肿瘤的发生和侵袭转移中起关键作用［10］，且受多种信号传导途径调节，包括PI3K/AKT和ERK等途径［11-12］。本研究利用shRNA转染脑胶质瘤U251细胞构建TRPM7低表达稳定细胞株，观察沉默TRPM7对U251细胞增殖、迁移、侵袭及PI3K/AKT/ERK信号途径的影响，为明确TRPM7在脑胶质瘤进展中的重要性及其作为新的治疗靶标提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 主要材料和仪器

人正常星形胶质HA1800细胞株、脑胶质瘤细胞株（U251、U87、U373）购自中国科学院上海细胞生物学研究所。DMEM培养基和胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）购自美国Hyclone公司。TRIzol试剂、PrimeScriptTM1st Strand cDNA Synthesis Kit试剂盒和TB GreenTMPremix Ex Taq Ⅱ试剂盒购自日本TaKaRa公司。shNC和shTRPM7购自上海吉玛制药技术有限公司。……