马 迪，张 放，苗智颖，王 静，徐 媛，杨佳宁，李淑英，郑春阳

宫颈癌是全球女性第4大常见恶性肿瘤，全世界每年新增宫颈癌病例约57万，死亡病例每年近31万[1]，我国宫颈癌患者数量占全球总数的 1/3。宫颈癌严重威胁了女性的健康和生命安全[2-4]。人乳头瘤病毒(Human papillomavirus，HPV)感染是女性宫颈病变的重要病因[5]。HPV E6/E7基因整合状态与宫颈癌变的程度密切相关，即HPV E6/E7基因整合率越高，宫颈癌变程度越高[6-7]。为进一步了解就诊女性人乳头瘤病毒感染状况，本文对华北理工大学附属医院妇科就诊女性的宫颈脱落细胞标本中HPV52感染及整合状况进行了分析，探讨HPV在宫颈病变中的作用机制，为宫颈病变患者的早期诊断和治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1标本收集 收集2016年1月至2018年3月华北理工大学附属医院妇科就诊女性的宫颈脱落细胞标本928例，就诊女性年龄范围在27～71岁，平均(43.5±5.0)岁，所有被检者检测前均未注射过HPV疫苗。标本收集过程如下：①以扩阴器暴露宫颈，用无菌生理盐水清洗取样部位；②用无菌棉签在被检者宫颈内按照顺时针方向旋转3 圈收集宫颈脱落细胞；③取出棉签，用无菌生理盐水洗脱棉签中宫颈脱落细胞；④将所收集标本分成2 份：1 份迅速冻存于-80 ℃，留作DNA提取并进行HPV感染及整合状况的检测，另1 份用于病理组织学诊断。实验中所用HPV52(含有HPV52基因组)质粒、β-actin质粒及293细胞DNA本实验室保存。

1.2病理细胞学诊断 将所收集宫颈脱落细胞进行洗涤后制片、染色，用光学显微镜镜检观察，记录结果，参照TBS(the 2001 Bethesda system)分级系统，对所收集标本进行病理细胞学诊断。……