玉木耳络氨酸酶基因的克隆及表达分析
2021-03-23苏文英杨和川谭一罗惠林冲秦裕营
苏文英,杨和川,谭一罗,惠林冲,秦裕营,李 晓
(1.连云港市农业科学院,江苏 连云港 222006;2.吉林农业大学 食药用菌教育部工程中心,吉林 长春 130118)
酪氨酸酶(Tyrosinase)是一种含铜糖蛋白,一般也称为多酚氧化酶,归类于酪氨酸酶相关蛋白家族(Tyrosinase-related Protein)[1]。酪氨酸酶广泛存在于微生物、动植物及人体中,并发挥着重要的生理功能[2]。在真菌中,双孢蘑菇的酪氨酸酶较早受到关注,在20世纪70年代,Turner 等就提出酪氨酸酶可能在双孢蘑菇(Agaricusbisporus)黑色素的合成中发挥相当重要的作用[3];络氨酸酶在氧气的参与下,将酪氨酸氧化为多酚类化合物(如L-多巴)及多巴醌,多巴醌在一系列反应后最终生成黑色素[4]。2016年宾夕法尼亚大学的杨亦农教授利用基因编辑技术对双孢蘑菇中控制褐变的多酚氧化酶基因进行了基因编辑,并将该酶的活性降低了30%,使其抗褐变[5]。此外,真菌络氨酸酶还与孢子的形成及稳定性相关。有研究表明,络氨酸酶在真菌菌丝无性生长时期发挥重要的作用,其表达量在菌丝生长期间逐渐上升,至子实体形成时开始下降[6]。目前,香菇(Lentinusedodes)[7]、漏斗多孔菌(Polyporusarcularius)[8]等真菌中的络氨酸酶基因已被克隆鉴定,为其在真菌内的表达模式分析及功能研究提供了方便。
玉木耳(AuriculariacorneaEhrenb.),隶属于木耳科木耳属,是毛木耳的白色变种[9],其质地脆嫩,美味可口,营养丰富,且具有抗肿瘤等活性[10-11]。目前关于玉木耳的研究集中在栽培、生理活性及成分分析方面,对其分子遗传学的研究还鲜有报道。鉴于此,我们在克隆玉木耳……
