莪术油对人子宫内膜癌HEC-1-B细胞增殖、凋亡及Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响*
2021-03-22李伟宏田莉刘俊保
李伟宏,田莉,刘俊保
1.郑州澍青医学高等专科学校,河南 郑州 450064;2.河南省人民医院,河南 郑州 450003
子宫内膜癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,且预后不良[1-2]。中药诱导肿瘤细胞凋亡治疗肿瘤是有效的治疗手段,应用中药治疗肿瘤得到了广泛的关注。莪术油有较好的抗肿瘤、抗炎、抗病毒、细胞凋亡[3-4]等作用;其主要有效成分为莪术酮、莪术二酮等。但关于莪术油对子宫内膜癌细胞的研究报道较少,本研究将探讨莪术油对HEC-1-B细胞的增殖、凋亡及其可能的作用机制。
1 材料
1.1 细胞株和细胞培养HEC-1-B细胞株由上海歌凡生物科技有限公司提供。将细胞培养于DMEM培养基(10%胎牛血清)中,放入5%CO2、37℃培养箱中孵育[10]。
1.2 药品及试剂DMEM培养基(美国康宁公司,批号:C2413118);标准胎牛血清(standard FBS,天津灏洋生物制品科技责任有限公司,批号:20191230);四甲基偶氮唑蓝(methylthiazolyl tetrazolium,MTT,美国Sigma公司,货号:88417);DMSO(美国Amresco公司,货号:472301);Hoechst 33258染色剂(美国Sigma公司,货号:BK17520);Caspase-3、Bax与Bcl-2抗体(美国Cell signaling technology公司,货号分别为:9622、5023、15071);ECL化学发光液(碧云天生物技术有限公司,货号:P0018AS);莪术油注射液(徐州莱恩药业有限公司,批号:H20067076)。
1.3 仪器倒置显微镜及照相装置(日本Olympus公司);CO2培养箱(日本SANYO公司);SW-CJ-2FD型超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司);低速离心机(北京医用离心机厂);MP200A型电子天平(上海精科天平);DNM-9602G酶标分析仪(北京普朗新技术有限公司);Mini-REPOTEANⅡ(Bio-Red公司);DYY-Ⅲ型电转移槽(北京六一仪器厂)。
2 方法
2.1 MTT法检测莪术油对HEC-1-B细胞增殖抑制作用将生长达到80% ~90%的HEC-1-B细胞弃掉培养液,PBS冲洗后加入0.25%胰酶细胞消化液,当细胞密度达到1×104·mL-1时将此注入96孔板内,每……
