李益欢 钱春生 张斌 何云文 陈传新

(江苏大学 1医学院，江苏 镇江 212013；2附属金坛医院神经外科)

脑外伤导致的昏迷仍是世界范围内的难题，对患者本人和家庭的影响巨大〔1〕。近年来，部分学者认为迷走神经电刺激具有一定的促醒潜能，可通过刺激迷走神经对大脑皮层重要区域进行调控，但具体机制尚未阐明〔2〕。5-羟色胺2A受体(5-HT2AR)和γ-氨基丁酸b受体(GABAbR)是脑内与睡眠觉醒密切相关的物质〔3〕。为探究迷走神经电刺激对两者表达的影响，本研究对脑外伤昏迷大鼠进行相关实验。

1 资料和方法

1.1实验动物及分组 108只雄性成年SD大鼠(由华西医学院实验动物中心提供)，清洁级，体质量250～300 g，自然光照下常规饲养，室温保持在23℃左右。根据随机数字表法将其分为刺激组、假刺激组和空白组各36只。实验大鼠均健康，刺激组平均体重(232.7±7.6)g，假刺激组平均体重(233.5±7.7)g，空白组平均体重(233.0±7.5)g，3组大鼠体重无显著差异(P>0.05)，具有可比性。

1.2实验设备及试剂 (1)MNT冷冻切片机(德国SLEE公司)；(2)ES-420型电刺激仪(日本伊藤超短波株式会社)；(3)Eppendorf 5427 R台式高速冷冻离心机(艾本德中国有限公司)；(4)MY2300全自动免疫组织化学染色仪(澳大利亚郝思林公司)；(5)兔抗GABAbR抗体(ab75239)和兔抗5-HT2AR抗体(BA47258)均购自武汉博士德有限公司；(6)10%水合氯醛(青岛宇龙海藻有限公司)。

1.3实验方法

1.3.1脑外伤昏迷大鼠模型制备 通过自由落体撞击法制备脑外伤昏迷大鼠模型。具体步骤：将刺激组和假刺激组大鼠放在标本缸中，腹腔注射10%水合氯醛麻醉(0.5 ml/100 g)。麻醉后头顶备皮消毒，逐层切开至暴露顶骨。在人字缝与颅顶冠状缝交点处固定一圆形铁板。大……