吕静 刘超 李可佳 周晓慧 薛晶 王明娟

(承德医学院 1基础医学院,河北 承德 067000;2附属医院心脏内科;3形态学实验中心)

子宫内膜癌是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一，近年来发病率呈上升趋势，且晚期、复发性子宫内膜癌预后极差，临床治疗十分困难〔1，2〕。因此寻找特异性强的分子标志物及子宫内膜癌致病机制的确切靶点用于子宫内膜癌的早期诊断和治疗尤为重要。长链非编码RNAs(LncRNAs)是一类不具有编码蛋白质功能，核苷酸长度>200 nt的RNA分子，在多种肿瘤的发生发展中发挥至关重要的作用，是潜在的肿瘤标志物及治疗靶点〔1，3，4〕。LncRNA-ATB位于人类第13、14、22号染色体上，研究发现在多种肿瘤中异常表达，如肝细胞癌〔5〕、肺小细胞癌〔6〕、结肠癌〔7〕、乳腺癌〔8〕等。但其对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响尚未见报道。本研究通过靶向抑制子宫内膜癌细胞内LncRNA-ATB的表达，观察LncRNA-ATB对子宫内膜癌细胞增殖能力、凋亡水平、迁移和侵袭能力的影响，以期为寻找早期诊断子宫内膜癌的分子标志物及其治疗的确切靶点提供有价值的理论和实验依据。

1 材料与方法

1.1材料 人子宫内膜癌Ishikawa细胞株购自南京凯基生物公司，人子宫内膜癌HEC-1-A细胞株购自北京北纳联创公司，RPMI1640培养基、胎牛血清(FBS)购自Gibco公司，McCoy 5A培养基购自中科迈晨，TRIzol试剂、Lipofectamine2000、荧光定量PCR试剂盒购自美国Invitrogen公司，二甲基亚砜(DMSO)、噻唑蓝(MTT)、胰蛋白酶-二氨基联苯胺(EDTA)消化液(0.25%)、胰蛋白酶(0.25%，不含EDTA和酚红)，磷酸盐缓冲液(PBS)购自Solarbio公司，FITC标记的Annexin-V及碘化丙啶(PI)试剂购自美国BD公司，Transwell小室购自美国Corning公司，LncRNA-ATB-SiRNA及LncRNA-ATB-NC由上海吉玛公司设计并合成，RNA逆转录和实时荧光定量聚合酶链反应试剂盒购自日本TaKaRa公司。