杨雅嵋 何浩 王文平 冉伟 曾玉华

(川北医学院附属医院 1妇产科，四川 南充 637000；2重症医学科)

自交联透明质酸钠凝胶是目前临床上常用的防止宫腔粘连(IUA)方法，相容性好、流动性强、半衰期长〔1，2〕，但具体机制尚不明确。IUA伴随炎症反应；同时引起纤维细胞增生，而纤维细胞增生受纤维蛋白的调控〔3〕；已有研究表明大鼠阴道炎、宫颈炎、盆腔炎等疾病中炎症水平升高、纤维细胞增生影响疾病进程〔4,5〕。因此降低机体炎症水平、降低组织纤维化对缓解IUA极为重要。本研究建立IUA模型，观察自交联透明质酸钠凝胶对IUA大鼠的保护作用并探讨对核转录因子(NF)-κB相关因子的影响。

1 材料与方法

1.1实验动物 清洁级健康SD雌性未孕性成熟大鼠〔川北医学院实验动物中心，许可证号：SCXK(川)2017-0025〕，体重200～220 g。所有大鼠在温度(25±1)℃、湿度(50±10)%、光照/黑暗12 h/12 h的实验动物中心常规饲养1 w进行后续实验。实验均经医院动物实验伦理委员会批准。

1.2试剂与仪器 苯酚(上海麦克林生化科技有限公司，批号：108-95-2)，自交联透明质酸钠凝胶(安徽引导者医疗科技有限公司，批准文号：3641453)，苏木素-伊红(HE)染色试剂盒(碧云天生物技术有限公司，批号：C0105)，Masson染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司，批号：G1340)，大鼠肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、IL-18酶联免疫(ELISA)试剂盒，一抗NF-κB抗兔、转化生长因子(TGF)-β1抗兔、结缔组织生长因子(CTGF)抗兔、胶原蛋白(collagen )Ⅲ抗鼠、collagen Ⅰ抗鼠、内参GAPDH抗鼠、二抗羊抗鼠、羊抗兔(英国abcam，批号分别为：ab208348、ab100704、ab216165、ab238420、ab179695、ab125943、ab6310、ab6308、ab8245、ab150117、ab150077)，RNA提取试剂盒(美国Invitrogen，批号：12183020)，cDNA反转录试剂盒(美国Fermentas，批号：K1622)，2×Hi SYBR Green QPCR Mix(北京百奥莱博科技有限公司，编号：PC3301)，二氨基联苯胺(DAB)显色试剂(上海生工生物工程有限公司，批号：PW017)。……