马瑞 马瑜徽 张新月 耿印 陈岚芬 张学宁 王晓莉

（潍坊医学院医学影像学院，山东潍坊 261053）

缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy, HIE）是新生儿围生期窒息引起的缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD），常可导致脑白质损伤（white matter damage,WMD）[1]。由于脑完整性破坏，脑信息处理速度减慢[2]，往往出现学习能力差、记忆力减退等认知障碍的临床症状，是HIBD的重要临床表现。因此，WMD修复程度是评价HIBD疗效的重要指标。研究发现褪黑素（melatonin, Mel）具有抗炎、抗氧化的作用[3]，且可促进未成熟脑白质的修复[4]，从而减轻WMD，但不同Mel治疗方案对受损脑白质保护作用的差别尚有待于进一步研究[5]。本项目组前期研究发现Mel可促进HIBD新生大鼠脑内神经干细胞的增殖[6]，7日连续治疗（7-day continuous treatment, 7DCT）方案优于单次即刻治疗（singledose immediate treatment, SDIT），但增殖的神经干细胞能否修复WMD，以及不同Mel治疗方案对WMD的作用差别均尚不清楚。因此，本研究采用免疫荧光染色结合行为学实验法检测SDIT与7DCT两种不同Mel治疗方案对HIBD大鼠WMD的影响，以期为Mel治疗方案的选择提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组

SPF级7日龄Sprague-Dawley新生大鼠32只[SCXK（鲁）20190003，山东省济南朋悦实验动物繁育有限公司]，雌雄不限，平均体重（11.8±1.5）g，采用随机数字表法分为假手术组、HIBD组、SDIT组及7DCT组（n=8）。HIBD后21 d，各组大鼠行Morris水迷宫测试，HIBD后70 d，分别采用神经元核抗原（NeuN）免疫荧光染色法鉴定HIBD模型，并观察Mel治疗对新生大鼠远期脑损伤的影响，碱性髓鞘蛋白（MBP）/神经丝蛋白重链（NF200）免疫荧光双标法观察Mel治疗对大鼠远期WMD的影响。

1.2 HIBD模型的建立及各组处理

HIBD组、SDIT组及7DCT组大鼠据经典的Rice-Vannucci法制作HIBD模型[7]。吸入……