李 烨 ， 张 莹, ， 高忠燕 ， 张显光 ， 金振华 ， 王春仁 ， 史同瑞

(1.黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院 ， 黑龙江 齐齐哈尔 161005 ； 2. 黑龙江八一农垦大学动物科技学院 ， 黑龙江 大庆 163319 ； 3. 扎龙国家级自然保护区管理局 ， 黑龙江 齐齐哈尔 161002)

丹顶鹤为世界级濒危保护动物，是我国的一级保护动物，野生数量不足2 500只，主要分布在我国的黑龙江省和东部沿海、朝鲜北部、俄罗斯东部、日本北部等地[1]。丹顶鹤主要食用鱼虾、昆虫、蛙类等，辅食多为嫩叶、鼠类等。丹顶鹤的饮食习惯导致其患有鱼源性寄生虫病的风险大大提高。次睾吸虫的第一中间宿主为纹沼螺，第二中间宿主主要为麦穗鱼，据调查2019年齐齐哈尔地区麦穗鱼感染东方次睾囊蚴的感染率达到32.59%[2]。东方次睾吸虫(Metorchisorientalis)的囊蚴寄生于鱼背部肌肉或皮层内，丹顶鹤多因食入携带囊蚴的麦穗鱼而感染。东方次睾吸虫主要寄生于家禽和野生禽类的胆管和胆囊，偶尔也可以感染犬猫和人，属于人兽共患寄生虫[3-5]。病禽通常出现消瘦贫血，食欲不佳和腹泻等症状，严重时可以导致死亡。死亡后剖检，可见胆囊壁增厚，胆囊肿大，胆汁变性，胆道堵塞等病理变化[6]。人体感染后，会出现腹胀腹痛，肝区不适等临床症状[7]。快速准确地鉴定寄生虫种类是对流行病学、疾病防控和病原研究等方面的前提。寄生虫鉴定的传统方法是基于形态学鉴定，目前分子生物技术已经广泛地应用于鉴定寄生虫种类。核糖体DNA基因(rDNA)内转录间隔区(Internal transcribed spacer,ITS)的多态性序列分析(rDNA ITS序列分析)被认为是鉴定寄生虫虫种的良好基因标记，ITS序列可分为ITS1、5.8S rDNA和ITS2，特点是高度保守，进化速度快和种内差异小[8-10]。……