姜琳琳 ， 孙晓宇 ， 赵尘培 ， 王 莹 ， 朱洪伟 ， 张建龙 ， 于 馨 ， 陈国忠 ， 张兴晓

(1. 鲁东大学生命科学学院 ， 山东 烟台 264025 ； 2. 烟台市芝罘区疾病预防控制中心 ， 山东 烟台 264000)

紫花补血草[Limoniumfranchetii(Debx.)Kuntze]属白花丹科(Plumbaginaceae) 补血草属(LimoniumMiller)，为中国特有种，又名烟台补血草。补血草属植物作为中草药，具有补血、散瘀、抗菌消炎及抗肿瘤等功效，但有关紫花补血草的活性成分及药理作用的研究较少[1-4]。目前，犬肿瘤的治疗多采用手术结合放化疗进行，尽管治疗效果有一定改善，但化疗药品毒副作用较大[5-6]。中草药作为天然药物，在治疗肿瘤过程中，不仅可以减轻化疗的毒副作用，而且不易产生耐药性，具有较好的应用前景[7-8]。因此，本研究以犬乳腺癌原代细胞为体外模型，采用紫花补血草提取物处理犬乳腺癌细胞，观察其对细胞增殖、迁移的影响，为进一步开发犬肿瘤治疗的天然药物提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 紫花补血草，采自烟台市芝罘岛海边山坡；犬肿瘤组织来源于山东农业大学动物医院就诊的病例。

1.2 主要试剂 DMEM培养基及胎牛血清，均购自美国Gibco公司；二甲基亚砜(DMSO)及MTT试剂，均购自美国Sigma公司；胰蛋白酶，购自上海碧云天公司；TRIzol、RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit试剂盒、LC-MS用各化学试剂(色谱纯)，均购自美国Thermo Fisher Scientific公司；ChamQ SYBR qPCR Master Mix (High ROX Premixed)试剂盒，购自南京诺唯赞生物科技股份有限公司。

1.3 主要仪器 超高效液相色谱仪、质谱、C18色谱柱、CO2恒温培养箱、超微量分光光度计、实时荧光定量PCR仪，美国Thermo Fisher Scientific公司产品；倒置显微镜，Olympus公司产品；低速离心机，湘仪公司产品；流式细胞仪，美国BD公司产品。……