马 芹 ， 许明清 ， 汪建华 ， 赵 杰 ， 张中波 ， 石艳红 ， 李玉峰 ， 张秀美

(1. 山东和康源生物育种股份有限公司 ， 山东 济南 250102 ； 2.山东省农业科学院家禽研究所 ， 山东 济南 250031 ；3. 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 ， 山东 济南 250100)

新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus，NDRV)感染最早发生在我国南方地区，北方较少报道[1-3]，自2015年开始，北方樱桃谷鸭的NDRV检出率明显增高[4-5]。近2年，NDRV在山东地区的樱桃谷鸭中广泛流行，主要引起雏鸭精神沉郁、食欲废绝，消瘦，跗关节肿胀、腿软等一些特征性的症状[6-8]，料肉比明显升高，剖检可见脾脏出血、坏死，机体免疫力下降，进而继发感染导致较高的死亡率[9]；同时关节肿胀、瘸腿现象较为严重，造成了较高的淘汰率，给养殖带来了巨大困扰。近日，山东菏泽樱桃谷部分鸭出现脾脏坏死、瘸腿症状，本课题组通过对8个鸭养殖区进行调研，了解到腿病主要发生于6～8周龄的雏鸭，并且发病鸭大多表现脾脏异常，据此初步怀疑与新型鸭呼肠孤病毒有关。本试验从病死鸭中采集肝脏、脾脏，进行病原的分离鉴定、纯化培养及致病性分析，探究新型鸭呼肠孤病毒是否为引发脾脏坏死、瘸腿症状的原因，以期为该病的综合防控提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 病料 山东菏泽地区商品肉鸭养殖场10日龄发病鸭。

1.2 试验用鸡胚、动物、细胞 7日龄SPF鸡胚，购自山东斯帕法斯公司；1日龄商品鸭、35周龄健康樱桃谷种鸭，均购自山东和康源生物育种股份有限公司；Vero细胞由本实验室提供。

1.3 主要仪器与试剂 PCR仪，购自伯乐生命医学产品有限公司；……