阿仑膦酸钠对大鼠成骨细胞的影响
2021-03-15赖蔚文
赖蔚文,戴 闽,戴 玥
(1.南昌大学第一附属医院,江西 南昌 330000;2.赣州市于都县人民医院,江西 赣州 342300)
成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,在骨基质的合成、分泌和矿化中起到重要的作用[1]。成骨细胞的功能很大程度上取决于成骨细胞的成熟度和成骨细胞的状态[2]。所以成骨细胞功能多用于骨质疏松的临床评价中。阿伦磷酸钠作为治疗骨质疏松的一线药物,可以有效降低老年患者脊柱、髋部和非脊柱部位骨折的风险[3]。因此,本文主要探讨阿伦磷酸钠通过对成骨细胞的影响,从而为骨质疏松治疗方案提供新依据。
1 材料与方法
1.1实验材料:本研究实验材料及试剂见表1所示。
1.2方法:以6个月龄的20只SD大鼠作为实验研究对象,随机分为阿仑膦酸钠组B(n=10)和空白对照组(n=10)。空白对照组大鼠每日灌胃生理盐水,阿仑膦酸钠组B大鼠每日灌胃阿仑膦酸钠维D3的水溶液,剂量按照人鼠体表面积折算,剂量为 3.5 ml/(kg·d)。采用双能X线吸收法(DXA)分别于治疗前、治疗后26周和治疗后52周,测量大鼠腰椎L2~4、股骨颈、大转子与全髋关节4个部位的骨密度值,并比较治疗前后各部位骨密度的变化。选择Ⅱ型胶原酶处理SD级大鼠(24 h以内),分离大鼠的颅骨,得到成骨细胞。在0.25%胰蛋白酶的消化传代进一步培养,得到二代细胞。随后取第二代成骨细胞,接种,细胞80%融合后弃去培养基;①换加入不同浓度阿仑膦酸钠(1.0×10-10~1.0×10-4)的无血清DMEM培养基,分别培养24 h、36 h、48 h,加入MTT溶液20 μl,于37℃ 5%二氧化碳培养箱中培养4 h,弃去上层溶液,加入DMSO试剂150 μl,轻轻振荡混匀,10 min后,用酶标仪测定490 nm波长下每孔的吸光度,确定不同浓度阿仑膦酸钠对成骨细胞增值促进、抑制作用;……
