传锋彬，史红阳，孔振兴

(1.渭南市中心医院呼吸与危重症医学科，陕西 渭南 714000；2.西安交通大学第二附属医院呼吸与危重症医学科；3.西安市第四医院检验科，陕西 西安 710004)

肺癌是癌症相关死亡的主要原因，患者5年平均生存率仅为约15%[1]。其中，非小细胞肺癌约占所有肺癌的80%。肿瘤标志物神经烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)可用于非小细胞肺癌的早期诊断和病理类型鉴别[2]。非小细胞肺癌常基于Kras基因的驱动突变，与吸烟相关的人非小细胞肺癌中，超过25%与活化的Kras突变有关[3]。另有研究显示，调节性T细胞(regulatory T cells，Tregss)可在人非小细胞肺癌早期和晚期中大量累积[4]。Tregss通过抑制效应T细胞，维持组织的完整性，并且短暂清除Tregss可有效降低机体的肿瘤负荷[5]。但是，完全清除Tregs也会诱发致命的自身免疫性疾病。现有Tregs靶向治疗，如CD25抗体治疗，由于特异性较低，会使活化的效应T细胞耗竭[6-7]。因此，通过局部清除Tregs或优先靶向免疫抑制Tregs亚群来促进抗肿瘤免疫的有效策略具有重要意义。本研究拟检测Kras突变非小细胞肺癌(KrasG12D)小鼠血清中NSE、CEA的水平，及其Tregs中ST2蛋白的表达；进一步探讨ST2抗体治疗对Kras突变非小细胞肺癌小鼠血清中NSE、CEA及其肿瘤负荷和抗肿瘤免疫反应的作用，以期为治疗Kras突变的非小细胞肺癌中活化的Tregs提供一定的实验依据。

1 材料方法

1.1 主要试剂

CD25(PC61)、CD4(RM4-5)、Foxp3(FJK-16s)、ST2(RMST2-2)、NK1.1(PK136)和PD1(J43)抗体购于美国BD生物科学公司。同型对照免疫球蛋白购于武汉艾美捷科技有限公司。

1.2 实验小鼠分组

40只健康雄性KrasG12D非小细胞肺癌小鼠及8只对照野生型(wild type，WT)非小细胞肺癌小鼠购于美国Jaxlab公司，在SPF清洁级环境下饲养。……