冯久芳，梅 芊

(1.商丘市食品药品检验检测中心，河南 商丘 476000；2.河南省食品药品检验所，郑州450018)

谷维素片为镇静助眠类非处方药品，研究[1-2]显示，其具有调节自主神经功能及内分泌平衡障碍的作用，在神经官能症、经前期紧张综合征、更年期综合征等疾病的临床治疗中被广泛应用。查阅相关资料[3-5]发现，谷维素及谷维素片的现行标准为《卫生部药品标准》，且本品多从米糠油、胚芽油等谷物油脂中提取，并以混合物形式存在，组分组成及含量可受提取物产地、季节变化及提取工艺影响，故实行全面质控的难度大。本研究基于高效液相色谱分析技术，对国内外谷维素片样本的高效液相特征峰及主要成分含量的进行对比分析，比较不同厂家生产的谷维素片成分含量，旨在为谷维素及其片剂的质量控制提供参考，总结如下。

1 仪器及样品

1.1 检测仪器 本次选用美国安捷伦公司生产的Agilent 1200高效液相色谱仪，梅特勒托利多仪器有限公司生产的XS205DU电子天平，昆山市超声仪器有限公司生产的KQ-600VDB型三品数控超声波清洗器。

1.2 谷维素片样品 此次所用的纯度99.53%γ-谷维素标准品由Stanford Analytical Chemicals Inc.提供，国产谷维素片样品为2014年全国评价性抽样检验样品，涉及山西云鹏制药有限公司、上海玉瑞生物科技药业有限公司、天津力生制药股份有限公司3家企业共30批次，规格均为每片10 mg。

2 方法

2.1 色谱条件 色谱柱为Innoval C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相：乙腈-甲醇(甲酸铵含量5 mmol·L-1)=50∶50，1 mL·min-1；柱温设定35 ℃，进样体积为20 μL，DAD检测器，检测波长326 nm。

2.2 溶液的制备 对照品溶液制备：称取谷维素对照品约10 mg，精密称定，置于100 mL量瓶中，加入适量无水乙醇，超声处理使溶解后，冷置，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。供试品溶液制备：取供试品10片，精密称定，研细，取细粉适量(约相当于1片量)，精密称定，置于100 mL量瓶，同法处理后冷置、摇匀、滤过后取滤液，作为供试品溶液。阴性对照溶液的制备：选取处方量的辅料混合均匀，制备缺谷维素阴性样品，制成阴性对照溶液，方法同上。

2.3 系统适用性试验 取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液分别进样测定，记录色谱图，结果在谷维素主峰位置无干扰。见图1。

2.4 线性关系考察 取谷维素对照品约10 mg，精密称定，置于100 mL量瓶中，加无水乙醇适量，超声处理使完全溶解后，冷置，加无水乙醇至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密量取对照品储备液1、2、3、5、10、15、20 mL，分别置于25 mL量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀。分别精密量取上述溶液各20 μL，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，样品浓度为横坐标进行线性回归，回归方程为：Y=164.23X+0.17(r=0.999 9)，表明谷维素浓度在4.104～82.080 mg·mL-1范围内，线性关系良好。

注：1为谷维素色谱主峰

2.5 重复性实验 随机选取同一批次谷维素片，依照上述方法平行制备6份供试品溶液，进样测定，谷维素平均含量约为97.54%，相对标准差(RSD)为0.60%，证实重复性良好。

2.6 回收率试验 称取适量阴性样品置于200 mL量瓶中，分别加入对照品储备溶液4、5、6 mL，依照供试品溶液制备方法配置为80%、100%、120%的回收率溶液，每个浓度3份，进样测定后计算回收率，平均回收率达101.20%(RSD为0.40%)。

3 结果

3.1 样品测定结果 3家国有企业的30批次谷维素片样品含量介于95.00%～105.00%，其中含量95.00%～96.99%占11批次，97.00%～98.99%占19批次，99.00%～100.99%占16批次，101.00%～105.00%占14批次。

3.2 国产谷维素片及相对成分含量 3家国有企业中不同企业及不同批次生产的谷维素片色谱图中存在色谱峰差异，依照峰面积归一化方法计算得出各色谱峰相对含量。见表1。

表1 国产谷维素片相对成分含量比较

4 讨论

4.1 测定方法选择 谷维素片临床广泛应用于调节自主神经功能及纠正内分泌平衡障碍，考虑其提取物来源及混合物存在形式，现行标准下的谷维素片剂中亦可能存在元素杂质，可能影响药物安全性[6]。市场现有的谷维素片中各组分存在差异性，有研究[7]采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对不同厂家生产的谷维素片特征谱图相似的评价结果进行分析发现，我国企业生产的谷维素片含量范围存在一定差异，且与谷维素原研发国日本企业生产的谷维素片存在一定差异性，因此国产谷维素片的质量控制尤为重要。近红外漫反射光谱分析技术、改变溶剂的UV法均为目前进行谷维素含量测定的常用方法，但是其测定过程较为繁琐，并不能满足目前制药企业实施在线质控的需求[8]。依照谷维素的化学性质特点，本文采用高效液相色谱技术分析不同厂家生产谷维素片的含量，方法准确，简便易行。

4.2 溶剂的选择 本研究表明，谷维素可在氯仿、二氯甲烷中溶解，在乙醇及正庚烷中微溶，但不溶于水，此次分别选取二氯甲烷、乙醇及正庚烷三种溶剂溶解，以考量最适用于谷维素的溶剂。本实验结果表明，用无水乙醇作为溶剂，溶解充分且环境污染小。

4.3 色谱条件优化 色谱条件优化处理及重复率实验、回收率实验，符合方法学要求，为谷维素片生产的质量控制及含量测定提供有效参考。但本次研究仍存在一定不足之处，如未对谷维素片元素杂质含量进行细致分析，未明确组分及相对含量对谷维素片疗效差异性的影响，后续将加强对此方面的深入研究。

综上，基于高效液相色谱技术分析不同厂家生产谷维素片成分的方法准确可靠，可用于谷维素片组分及相对含量的测定，亦可为后续的谷维素片组分及疗效相关性分析奠定基础。