李小会 ，贾国华，王 琦，雷根平，谷浩荣，陈丽名

（1.陕西中医药大学，陕西咸阳 712000；2.北京王府中西医结合医院肾病科，北京 102209；3.河南省灵宝市中医院，河南灵宝 472500；4.陕西中医药大学附属医院，陕西咸阳 712000）

糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy，DN）以蛋白尿及肾功能受损为特征，是导致终末期肾衰竭的主要病因。足细胞受损是DN 蛋白尿的始发机制，线粒体功能障碍在DN足细胞损伤中起核心作用。DN 时活性氧（Reactive oxygen species，ROS）过量产生，出现氧化应激及炎症反应，最终累及足细胞线粒体［1］，启动并促进了DN 的发生发展。前期研究证实通络益肾方是治疗DN 的有效方剂［2-9］，本研究通过观察DN 大鼠足细胞线粒体功能的变化及通络益肾方的干预效果，以阐明该方的作用机制。

1 材料

1.1 动物 SPF 级SD 大鼠，雄性，260 只，体质量（200±20）g，购自西安交通大学医学实验动物中心，动物生产许可证号SCXK（陕）2012—003。

1.2 试剂与药物 通络益肾方由生地、山萸肉、山药、茯苓、制附子、酒大黄、桃仁、全蝎、水蛭、泽泻组成。药材由陕西中医药大学附属医院提供，由陕西中医药大学中药鉴定教研室彭亮副教授鉴定为正品。大鼠用药剂量进行折算，加水煎煮2 次，质量浓度为2.38 g／mL。缬沙坦胶囊（北京诺华制药有限公司，批号X1870），制备成混悬液（1.44 mg／mL）；链脲佐菌素（美国Sigma 公司，STZ，批号X1966）；Trizol RNA 分离试剂盒（美国Invitrogen 公司，批号15596-026）；SYBR Mix、逆转录试剂盒（日本Takara公司，批号RR036 A、10102ES）；JC-10 试剂盒（北京索莱宝科技有限公司，批号CA1310）。

1.3 仪器 Tecai G2 Spirit 透射电镜（美国FEI 公司）；Lightcycler96 反应仪（法国Eppendorf 公司）；流式细胞仪（美国Beckman Coulter 公司）；罗康血糖仪（德国罗氏有限公司）。

2 方法

2.1 建模 大鼠适应性喂养1 周，3%戊巴比妥钠（30 mg／kg）腹腔注射麻醉行右肾切除，1 周后 STZ 腹腔注射（45 mg／kg）；……