刘经州，杨红群，宋春侠

（1.承德医学院附属医院，河北承德 067000；2.承德市妇幼保健院，河北承德 067000）

结肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，传统的手术、化疗等方法治疗结肠癌存在一定的局限性，而中医药治疗结肠癌有其独特优势［1］。因此，研发新的中医药对治疗结肠癌及提高其疗效具有重要意义。蒺藜Tribulus terrestris L.是蒺藜科植物蒺藜属植物，传统中药之一，蒺藜皂苷是从蒺藜中提取出的主要活性成分之一，其具有抗癌、治疗心血管疾病的作用［2］。研究报道蒺藜皂苷能通过影响细胞周期及诱导细胞凋亡抑制卵巢癌细胞的增殖［3］。蒺藜总螺甾皂苷能抑制人卵巢透明细胞癌荷瘤裸鼠肿瘤作用［4］。蒺藜的皂苷提取物可诱导人乳腺癌MCF-7 细胞导凋亡［5］。但蒺藜皂苷对结肠癌增殖、凋亡的影响及其机制还尚不清楚。研究报道lncRNA AGAP2-AS1 在结直肠癌组织和细胞中上调表达，促进结直肠癌细胞的增殖［6］。沉默AGAP2-AS1 可抑制胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭，同时增强细胞的凋亡［7］。miR-646 在结直肠癌组织和细胞系中下调表达，高表达miR-646 可抑制结直肠癌细胞增殖和迁移［8］。因此，本实验旨在研究蒺藜皂苷对结肠癌增殖、凋亡的影响及其机制是否与lncRNA AGAP2-AS1 和miR-646 有关。

1 材料与方法

1.1 材料 结肠癌细胞株HCT116（上海冠导生物工程有限公司，批号C00135507）；DMEM 培养基（美国Sigma 公司，货号EY-4648）；蒺藜皂苷（纯度≥98%，上海同田生物技术股份有限公司，货号E-3190）；四甲基偶氮唑盐比色法（methyl thiazolyl tetrazolium assay，MTT）试剂盒（德国IBL公司，货号JKSJ—1812）；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素／碘化丙锭（Annexin V-Fluorescein isothiocyanate／propidium iodide，Annexin V-FITC／PI）凋亡检测试剂盒（日本同仁研究所，货号AD10-2）；……