贺 珊 廖长秀 罗 莹黄桂坤潘 勇韦建开

（1.右江民族医学院药学院，广西百色 533000；2.广西肝胆疾病临床医学研究中心，广西百色 533000；3.右江民族医学院基础医学院，广西百色 533000）

走马胎Ardisia gigantifolia Stapf 为紫金牛科紫金牛属植物走马胎的干燥根茎，是广西民间应用较多的药物。有祛风湿、壮筋骨、活血祛瘀的功效，主治风湿筋骨疼痛、跌打损伤、产后血瘀和痈疽溃疡等［1-2］。研究发现走马胎主要成分有三萜皂苷类、没食子酸等［3］，其中三萜皂苷类成分对多种肿瘤细胞均具有较强的抗肿瘤作用［4-6］。课题组前期研究发现走马胎水提液和醇提液及活性组分群均可明显抑制肝癌细胞增殖、侵袭和转移，并诱导其凋亡［7-8］，但其抗肝癌机制尚不清楚。课题组前期采用基因表达谱芯片筛查发现走马胎水提液可显著升高肝癌细胞双特异性磷酸酶（dual specificity protein phosphatase，DUSPs）家族DUSP1、 DUSP4 和DUSP5 mRNA 表达水平（分别为8.5 倍、6.5 倍和19 倍）。DUSPs 家族中大部分成员为丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路的负向调节剂，参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭转移和耐药等过程［9-10］。本研究观察走马胎活性组分对肝癌细胞DUSP1／4／5 mRNA 和蛋白表达及其下游ERK／JNK／p38-MAPK信号通路的影响，以期明确走马胎活性组分抗肝癌的可能分子机制。

1 材料

1.1 细胞株 人肝癌HepG2细胞购于中国科学院细胞库。

1.2 试剂 走马胎购于广西玉林中药材市场，由右江民族医学院覃道光副教授鉴定为走马胎根茎。胎牛血清（乌拉圭Lonsera 公司，批号MI09331）；DMEM 高糖培养基（美国 Gibco 公司，批号8117208）；索拉非尼（美国MedChemExpress 公司，批号 10003）；胰蛋白酶-EDTA 消化液（0.25%，不含酚红）、青链霉素混合液和MTT（北京索莱宝科技有限公司，批号分别为20160422、20160525、822A054）。……