刘蕾

近年来，临床上以革兰阴性（Gram negative，G-）杆菌为代表的多重耐药细菌的检出率呈快速上升趋势，为临床抗感染治疗带来了巨大挑战［1-2］。为了解秦皇岛市山海关人民医院的病原菌分布特点及耐药变化趋势，以便控制和减少细菌耐药性的产生，本文回顾分析2018 —2020 年该院分离的常见病原菌，并与已发表文献进行比较［3］，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 收集2018 年1 月—2020 年12 月秦皇岛市山海关人民医院送检的1 032 份标本中分离的常见病原菌，除去同一患者分离的重复菌株。

1.2 样本采集和细菌培养 参照《全国临床检验操作规程（第四版）》［4］，对样本进行接种、培养，最终分离出单个菌落，确定细菌菌属后，使用珠海美华医疗科技有限公司产品进行微生物鉴定和药敏试验，复核药敏试验采用纸片扩散法，药敏折点判断根据2019 年美国临床和实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）M100 文件［5］推荐的标准。质量控制（质控）菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923、粪肠球菌ATCC29212、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853。

1.3 伦理学 本研究符合医学伦理学标准，并经本院伦理审批（审批号：20210915），所有检测获得过患者或家属的知情同意。

1.4 统计学分析 应用WHONET 5.6 软件对数据进行统计分析，计数资料以株（%）表示。

2 结果

2.1 标本来源 标本主要来源为呼吸道标本（占46.4%），其他依次为血液标本（占30.0%）、伤口脓液标本（占10.0%）、尿液标本（占8.0%）、粪便标本（占2.0%），以及其他标本（占3.6%）。住院患者和门诊患者分离菌株分别占总菌株数的99.4%和0.6%。

2.2 检出病原菌构成 2018—2020 年本院共检出病原菌1 032 株，其中G-菌777 株，占75.3%；革兰阳性（Gram positive，G+）菌230 株，占22.3%；真菌25 株，占2.4%。G+菌中检出率最高的前5 位依次为金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌属、肺炎链球菌和无乳链球菌。共检出558 株（占54.1%）肠杆菌科细菌，其中检出率最高的前5 位分别为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、变形杆菌属、沙门菌属。共检出219 株（占21.2%）非发酵菌，检出率最高的依次为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌。见表1。

表1 2018 —2020 年本院分离的1 032 株常见病原菌分布

2.3 G+球菌药敏试验

2.3.1 肠球菌属 肠球菌属包括粪肠球菌14 株（占48.3%），屎肠球菌15 株（占51.7%）。屎肠球菌对多数抗菌药物的耐药率均明显高于粪肠球菌，未检出对万古霉素、利奈唑胺耐药或中介的肠球菌。见表2。

表2 粪肠球菌和屎肠球菌的药敏试验结果

2.3.2 葡萄球菌属 117 株金黄色葡萄球菌中，9 株（占7.7%）不产青霉素酶，有18 株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistantStaphylococcus aureus，MRSA）（占15.4%）。20 株表皮葡萄球菌中，有14 株（占70.0%）耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MethicillinresistantStaphylococcus epidermis，MRSE）。12 株除表皮葡萄球菌外其他凝固酶阴性葡萄球菌中，有6 株（占50.0%）甲氧西林耐药株（Methicillin-resistant strains in coagulase-negative staphylococci，MRCNS）。MRSA、MRSE、MRCNS 对大环内酯类、氨基糖苷类和喹诺酮类抗菌药物的耐药率均明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（Methicillin-sensitiveStaphylococcus aureus，MSSA）、甲氧西林敏感表皮葡萄球菌（MethicillinsensitiveStaphylococcus epidermis，MSSE）以及甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（Methicillin-sensitive coagulase-negativeStaphylococcussp，MSCNS）。MRSE对复方新诺明的耐药率明显高于MRCNS 和MRSA，而MSSE 对复方新诺明的耐药率也明显高于MSCNS和MSSA。未检出对万古霉素和利奈唑胺耐药或中介的葡萄球菌。见表3。

表3 葡萄球菌对不同抗菌药物的药敏试验结果

2.4 G-杆菌药敏试验

2.4.1 肠杆菌科 肠杆菌科细菌对氨苄西林的耐药率达72.7%～82.5%，而对氨苄西林/舒巴坦的耐药率为27.8%～36.0%；在232 株大肠埃希菌中产超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrum β-lactamase，ESBLs）的菌株占33.2%（77/232），碳青霉烯类耐药大肠埃希菌的检出率为0.4%（1/232），该菌对多数抗菌药物的耐药率均高于其他同科细菌；在219 株肺炎克雷伯菌中有6 株产ESBLs 菌株（占2.7%），碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant toKlebsiella pneumoniae，CRKP）的检出率为4.1%（9/219），该菌对多数抗菌药物较敏感。肠杆菌对头孢噻肟的耐药率均高于头孢他啶，可能与国内水解头孢噻肟ESBLs 使用较多有关［6］。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对β-内酰胺酶类耐药，主要因为产生ESBLs、Ampc 酶、碳青霉烯酶等，使病原菌耐药性增高［7］。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的敏感率较高，表明该类抗菌药物仍然是治疗以上两种病原菌最有效的。见表4。

表4 主要肠杆菌科细菌的药敏试验结果

2.4.2 非发酵菌 167 株铜绿假单胞菌中，耐碳青霉烯铜绿假单胞菌（Carbapenem-resistantPseudomonas aeruginosa，CRPA）的检出率为4.4%，该菌对抗菌药物普遍较敏感。耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌（CarbapenemresistantAcinetobacter baumannii，CR-AB）的检出率为55.0%，对多种抗菌药物耐药率均较高。见表5。

表5 非发酵菌的药敏试验结果

3 讨论

本院2018—2020年临床共分离1 032株病原菌，与文献［3］报道比较结果如下。① G+菌占比略低，G-菌占比与文献报道［3］基本一致；② 门诊标本来源仅占0.6%，明显低于其他二级医院，表明应增加门诊临床标本送检；③ 呼吸道和尿液标本占比较低，血液、粪便标本占比较高，表明本院血液和粪便标本送检更加规范；④ 肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌检出率均略高于文献报道［3］，标本主要来自呼吸道；⑤ 沙门菌的检出率较高，与本院粪便培养送检率较高有关，标本主要来自于粪便，其次为血液；⑥ 肠球菌属检出率略低于文献报道，金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌的检出率与文献报道相仿［3］。深部真菌的检出率为2.4%，其中白色念珠菌最常见，近年来深部真菌感染逐年增多［8］。

分析本院常见病原菌的耐药性并与文献［3］报道比较，结果如下：① MRSA、MRCNS 检出率较低，MRSE 检出率与文献基本一致［3］，葡萄球菌属对喹诺酮类抗菌药物的耐药率高于其他同级医院；② 肠球菌属的检出率略低于文献报道［3］，屎肠球菌对多数抗菌药物的耐药率均明显高于粪肠球菌；③ 碳青霉烯类耐药大肠埃希菌的检出率为0.4%，明显低于文献报道，且低于肺炎克雷伯菌，但大肠埃希菌对多数抗菌药物的耐药率均高于肺炎克雷伯菌，且对氨基糖苷类和喹诺酮类的耐药率高于其他同级医院；④ CRKP 的检出率与文献报道基本一致［3］，标本主要为呼吸道和泌尿道标本，均来自于内科病房，近年来CRKP 的检出率呈持续上升趋势［9］，因其所致感染的病死率高，应引起高度重视，积极采取措施；⑤ CRPA 检出率远低于其他同级医院，多数标本来自呼吸道，环丙沙星、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、美罗培南对其仍有良好的抗菌活性，该菌对碳青霉烯类的耐药率较低，因此在应用碳青霉烯类药物治疗时应进行耐药性监测，尽早发现耐药菌株［10］；⑥ CR-AB 的检出率高于文献报道［3］，标本主要为呼吸道标本，多数来自重症医学科，该菌对多种抗菌药物具有较高的耐药率，对米诺环素、多黏菌素的敏感率较高；⑦ 嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明、米诺环素、左旋氧氟沙星具有较高的敏感性。

综上所述，本研究比较本院细菌耐药监测结果与中国细菌耐药监测网（China Antimicrobial Surveillance Network，CHINET）二级医院结果的差异，更准确地掌握病原菌耐药和分布情况，虽然本院多数细菌耐药率均低于其他二级医院平均水平，但值得注意的是，多数病原菌对喹诺酮类的耐药率较高，耐碳青霉烯类肠杆菌科已被检出，且CR-AB 检出率已高于其他二级医院水平，因此面临细菌耐药性的严重威胁，应引起足够重视，加强院感控制，以减少和延缓耐药菌的产生。

利益冲突作者声明不存在利益冲突