周梦 余菲 邵春益 傅瑶

角膜内皮是位于角膜和前房房水间的单层细胞结构，它的泵功能和屏障功能对维持角膜的透明起着至关重要的作用［1-2］。角膜内皮细胞在人体内维持终身无复制状态，当临床上的常见疾病如大泡性角膜病变、Fuch 角膜变性等使得细胞数量低于临界值时，会引起患者角膜水肿，严重时损伤视功能［3］。目前，此类疾病主要的治疗方法仍然是穿透性角膜移植手术或角膜内皮移植，但供体角膜的缺乏限制了移植手术的开展。在角膜替代组织缺乏的现状下，组织工程角膜受到了广泛的关注，种子细胞、生物相容性佳的载体、利于细胞生长的环境是组织工程角膜主要的三个因素，而在这其中，获得足够量的种子细胞是至关重要的一环。内皮祖细胞（Endothelial progenitor cells，EPCs）是一种来源于成人外周血和骨髓的干细胞，作为分化为成熟血管内皮细胞的中间状态，其在心血管疾病领域被广泛研究［4］。内皮祖细胞可在体外大量获得和增殖，是组织工程种子细胞的理想来源，近年来也被用于角膜组织工程研究［5］。PAX6 基因在正常的人眼球发育过程中具有非常重要的作用，参与细胞的增殖、迁移和分化等过程，与角膜细胞的功能密切相关［6］。本研究通过观察大鼠骨髓内皮祖细胞在转染PAX6 基因后向角膜内皮细胞转分化的过程，探讨其作为组织工程角膜种子细胞的可能性。

1 材料和方法

1.1 实验试剂和仪器

4 只雌性4 周龄SD 大鼠（上海交通大学医学院附属第九人民医院SPF 级动物中心）。……