陈金凤，乐 伟，何 永，吴丽琴，贾宝玉，邓小淇，胡睿铭，黄冬艳，宋德平，邬向东，吴 琼，唐玉新，丁 珍

（江西农业大学 动物科学技术学院，江西 南昌 330045）

【研究意义】非洲猪瘟（african swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒引起的一种急性、高度接触性传染病。自1921年肯尼亚首次报道非洲猪瘟疫情后，该病在非洲大陆蔓延，随后传入欧洲和南美洲，2018年我国辽宁首次出现ASFV疫情，至今世界各地仍有疫情爆发的报道[1]。ASF被我国列为一类动物疫病，被世界动物卫生组织（world organization for animal health，OIE）列为A 类动物疫病，一旦出现必须上报。【前人研究进展】非洲猪瘟病毒（ASFV virus，ASFV）有介于痘病毒和虹彩病毒的特征，为一个新科，国际病毒分类委员会将其列入非洲猪瘟病毒属，ASFV 为唯一已知代表种[2]。ASFV 为单分子线性双链DNA 病毒，也是一种虫媒病毒。ASFV 基因组全长170～190 kb，含151 个开放阅读框，可编码150～200 种蛋白质[3]。ASFV基因编码的结构蛋白约有50种，包括囊膜蛋白CD2v、p30、p54；衣壳蛋白p72、p49；核壳蛋白多聚蛋白前体pp20和pp62；DNA 结合蛋白p10、pA104R[4]。【本研究切入点】B646L基因编码的p72蛋白，是ASFV的主要衣壳蛋白，蛋白大小约为73.2 ku，产生于病毒感染晚期，为病毒参与结合细胞的重要蛋白，其表达常作为病毒复制的标志[5]。Mallory Elizabeth[6]绘制的氨基酸重叠图中可知，在氨基酸1至171中，含有2个抗原表位，分别在160-165和165-171氨基酸肽段中，在图1中的C端被蓝色方格标记。【拟解决的关键问题】笔者根据ASFV AuhuiXCGQ毒株序列（GenBank登录号：MK128995.1）合成了ASFV p72全长基因，利用分子克隆技术构建了pET-28a-ASFV-p72 和pET-28a-ASFV-p72（1-171aa）原核表达质粒。通过E.coli原核表达系统获的p72全长和1-171aa融合蛋白，使其作为抗原免疫日本大耳白Balb/C兔，获得高效价兔源多克隆抗体，为非洲猪瘟血清学检测的发展提供依据。……