陈允妲，李雪亮，吴映函，赵晓艳，吴晓玉，王 飞*，陈金印

（1.江西省农业微生物资源开发与利用工程实验室，江西农业大学 生物科学与工程学院，江西 南昌 330045；2.江西省果蔬保鲜与质量安全创新中心，江西 南昌 330045）

【研究意义】海藻糖（Trehalose），又名蕈糖，是由2 个吡喃环葡萄糖分子以a，a-1，1 键连接而成的双糖，化学名为a-D-吡喃葡糖基a-D-吡喃葡糖苷[1-2]。海藻糖作为一种天然糖类，它在自然界的动植物和微生物中广泛存在，对生物有抗脱水、抗冷冻保护和抗高渗保护等多种作用。【前人研究进展】利用淀粉为底物直接生产海藻糖涉及2种酶，麦芽寡糖基海藻糖合成酶（maltooligosyltrehalose synthase，MTSase，由TreY 基因编码）和麦芽寡糖基海藻糖水解酶（maltooligosyltrehalose trehalohydrolase，MTHase，由TreZ 基因编码）[3]，作用途径（TreY-TreZ）如下：麦芽寡糖在MTSase作用下通过转糖苷作用，将起始的2个葡萄糖之间的a，a-1，4 键扭转成为a，a-1，1 键，形成麦芽寡糖基海藻糖，继而在MTHase 水解作用下，将起始的海藻糖从麦芽寡糖基上水解下来，形成麦芽寡糖（比初始底物少2 个葡萄糖基）和1 分子的海藻糖[4]。α-淀粉酶（EC 3.2.1.1）是一种水解淀粉α-1，4-葡萄糖苷键，生成低聚麦芽糖和葡萄糖的糖苷水解酶类，在食品发酵、制药等领域广泛利用。在根据蛋白质的序列同源性分类的CAZy数据库中，GH13家族被认为是最主要的α-淀粉酶家族，具有4-7个保守的序列区，包括了Asp-Glu-Asp 的催化三联体和重要的底物结合位点[5]，而这些特征在MTHase中也同时具有[6]。【本研究切入点】实验室分离筛选到的一株粘细菌Myxo⁃coccussp.V11在子实体形成阶段，细胞内可积累10倍于营养细胞阶段的海藻糖，通过……