王 艳，张秋蕾，王英华，俞向前，张 强，文德亮

（1.上海海关，上海 200135；2.青岛海关，山东青岛 226002；3.浦东新区动物疫病预防控制中心，上海 201299）

生物制品的生产通常以微生物或人/动物源的细胞、组织和体液等为起始原材料，其制备过程或制剂中可能添加人或动物来源的原材料或辅料。这些起始原料、原材料或辅料潜在的病毒污染是影响产品安全性的关键因素[1]。理论上，生物制品都存在病毒污染的潜在风险，应对产品病毒污染进行检测[1]。

外源病毒污染会影响疫苗的使用效果，甚至引起生物安全问题[2]。吴华伟等[3]检测发现，国内猪用活疫苗副流感病毒5 型污染率约为16.7%。牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus，BVDV）是疫苗生产中常见的外源性病原之一。美国菌种保藏中心（ATCC）于1994 年调查其细胞库，发现有13 株细胞污染了BVDV[4]；日本也曾有报道[5]，在5 批麻风腮及风疹疫苗中检出了BVDV核酸。猪圆环病毒（porcine circovirus，PCV）属于圆环病毒科，目前呈世界性流行，2010 年，葛兰素史克和默克两大疫苗生产厂商所生产的轮状病毒疫苗中均检出PCV[6]。猪细小病毒（porcine parvovirus，PPV）属于细小病毒科，能持续感染哺乳动物细胞系，会对以细胞为材料的生物制品生产产生潜在危害[7]。

目前，检测这三种病原的方法主要有RTPCR、ELISA、荧光RT-PCR，但都是多以单一病原的检测为主。与传统PCR 方法相比，荧光定量PCR 检测技术具有灵敏度高、快速简便等优点。本研究拟利用荧光定量PCR 技术探索可同时检测兽用疫苗中BVDV、PCV2 和PPV 3 种外源性病毒的方法，以主要的生物安全因子为关键点，建立可以快速检测相关生物安全因子的检测体系，可以同时检测出3 种外源污染因子，从而为兽用疫苗的生物安全保驾护航。……