刘光辉，张云辉，郑永征，潘铭东，孟春，徐朝阳

糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）是糖尿病（diabetes mellitus，DM）最为常见的微血管并发症之一，是全球主要的不可逆性致盲性眼病，需要进行早期防治。血-视网膜屏障（blood-retinal barrier,BRB）损害是DR 的早期表现，是DR 发生、发展的关键[1]。BRB 损害是目前DR 早期防治研究的热点。益景汤（原名加味补阳还五汤）是福建中医药大学附属人民医院眼科针对DR 气阴两虚夹瘀病机设计用于DR 早期防治的验方。既往临床研究中观察到益景汤能够改善DR 患者视网膜微循环、减轻黄斑水肿[2-3]，基础研究中显示益景汤能够抑制DM 大鼠BRB构成细胞的凋亡、减缓视网膜毛细血管的减少[4-5]。本次研究采用益景汤干预DM 大鼠，观察了其对视网膜微血管渗漏性及BRB 紧密连接相关蛋白表达的影响，探讨了益景汤用于DR 早期防治的效应及机制。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康雄性清洁级6 周龄SD 大鼠45 只，屈光间质透明，体重200±20 g，购买自上海斯莱克实验动物有限责任公司，许可证号：SCXK（沪）2017-0005。饲养于21～25℃环境，相对湿度为50%～55%。普通颗粒饲料喂养，自由饮水，12 h／12 h 明暗交替光照。实验动物的处理按国家科学技术委员会1988 年颁布的《实验动物管理条例》执行。

1.2 药物、主要试剂及仪器

益景汤（黄芪15 g、山药15 g、苍术9 g、桃仁5 g、红花5 g、当归9 g、川芎6 g、赤芍10 g 等），每剂浓煎至50 mL 备用，由福建中医药大学附属人民医院药剂科；链脲佐菌素（streptozotoci，STZ）购于美国Thermo Fisher 公司；抗封闭蛋白（occludin）抗体、抗连接蛋白5（claudin-5）抗体、抗闭锁连接蛋白1（zonula occludens 1，ZO-1）抗体购自美国abcam 公司；伊凡思蓝（evans blue，EB）购自上海生工生物公司；倒置荧光显微镜（TE2000-S）购自日本Nikon公司。……