宿蕾艳，张莎莎，张明明，魏春秀，方素萍，王颖，胡瑛，庄曾渊

眼部调节和集合功能异常，睫状肌和内直肌功能紊乱，可导致神经支配的异常或肌肉的过度紧张，引起视疲劳。眼的调节功能是依赖睫状体平滑肌的收缩和舒张来实现的，与细胞内游离钙水平关系密切。大鼠肉瘤（rat sarcoma，RAS）同源基因家族成员A（ras homolog gene family member A，RhoA）及蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）是平滑肌收缩的关键信号蛋白[1-3]。中医认为视疲劳属于“肝劳”，其核心病机是阴血不足、筋膜挛急。目舒丸为中国中医科学院眼科医院的院内制剂，具有活血养血，解痉止痛的功效，临床上用于治疗视疲劳，疗效确切[4-5]。本实验拟在细胞水平观察目舒丸对兔眼睫状体平滑肌细胞舒缩的影响，研究目舒丸治疗视疲劳的机制，为其临床合理应用提供数据支持。

1 材料与方法

1.1 实验动物

实验用3 月龄新西兰大白兔，10 只，体重2.5～3.0 kg，购于北京维通利华实验动物技术有限公司。饲养条件：12 h/12 h 交替光暗，温度25℃，湿度55%左右，自由饮食、饮水，动物房环境保持安静、通风良好。

1.2 主要试剂与仪器

氯化乙酰胆碱（上海梯希爱化成工业发展有限公司，批号：A0084）；二氧化碳培养箱（美国Thermo公司，型号：HERA CELL 150）；超净工作台（北京东联哈尔仪器制造有限公司，型号：SCB-1360）；倒置显微镜（美国，型号：OLYMPUS B071）；冷冻离心机（美国Sigma 公司，型号：1-14PK），酶标仪（美国BioRad 公司，型号：1450）；实时荧光定量聚合酶链式反应仪（美国BIO-RAD，型号：CFX96），基因扩增仪（美国BIO-RAD，型号：C1000）。

1.3 取材

取上述新西兰大白兔，无菌条件下摘取兔眼球，用含双抗的磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffered saline，PBS）冲洗，沿角膜缘后3 mm 处切……