张宇昕，盖 聪，马浩洁，程翠翠，张锦坤，杨璐平，冯琬迪，周梦琪，赵海虹，胡 蝶，孙红梅

(北京中医药大学良乡校区中医学院，北京 102488)

抑郁症是一种高患病率、高复发率和高自杀率的慢性精神疾病[1]。大量基础和临床研究表明，γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)能神经元功能异常在其中发挥重要作用[2]。神经元周围基质网络(perineuronal nets, PNNs)是一种主要包绕在小清蛋白(parvalbumin, PV)阳性(PV+)GABA能神经元周围的细胞外基质[3]，研究发现PNNs结构异常参与多种神经精神疾病的发病过程[4]，然而其在抑郁症中的作用目前尚不明确。因此，本研究拟通过慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictability mild stress，CUMS)建立抑郁动物模型，检测大鼠内侧前额叶皮层(medial prefrontal cortex, mPFC)脑区PNNs水平，及其主要组分蛋白聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、短小蛋白聚糖(Brevican)和GABA主要合成酶谷氨酸脱羧酶67(glutamic acid decarboxylase 67，GAD67)的表达水平，探讨应激对PNNs及GABA能神经元功能的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物分组及模型制备

健康成年雄性Sprague Dawley(SD)大鼠28只(220～240 g)，由北京维通利华公司提供。实验前动物适应性饲养1周，随机分为对照组和模型组，每组14只。模型组大鼠给予4周CUMS建立抑郁症模型[5]，每天随机选取一种长应激(禁水24 h、禁食24 h、拥挤24 h、倾斜24 h、持续光照24 h)和一种短应激(冷水游泳5 min、夹尾60 s、束缚2 h、频闪4 h、白噪音4 h)，同种应激不连续出现，防止动物产生适应性。对照组不做任何处理。28 d后进行行为学检测。每组4只用于免疫荧光实验，10只用于检测蛋白表达。

1.2 行为学检测

1.2.1糖水偏爱实验[6](sucrose preference test，SPT) 采用该实验考察应激是否导致大鼠出现快感缺失症状。测试分为两个阶段：适应阶段，第1天给予大鼠2瓶1%糖水适应24 h，第2天给予1%糖水和纯水各1瓶，12 h后调换位置；……