桑卡娜，李焕娟，杨绒娟，周德刚

(洛阳惠中兽药有限公司，国家兽用药品工程技术研究中心，河南洛阳 471003)

双葛止泻口服液是由洛阳惠中兽药有限公司、普莱柯生物工程股份有限公司和河南新正好生物工程有限公司联合研制的三类新兽药。双葛止泻口服液由金银花、葛根、黄芩、黄连、白芍和炙甘草组成，来源于《伤寒论》中的“葛根芩连汤”。方中金银花具有解热、抗炎、抗病毒等药理作用[1-2]，葛根芩连汤对感染性腹泻具有一定的治疗作用[3-4]。由于中药复方成分复杂，中药制剂中的不同成分对微生物有一定的抑制和杀灭作用，常规法进行微生物限度检测，不能真实反应样品中的微生物情况，需采用适当的方法，例如薄膜过滤法、中和剂、培养基稀释法等，去除其抑菌作用，并对方法进行验证来确定所采用的微生物限度检查方法的可行性和有效性[5-7]。依据2015年版 《中华人民共和国兽药典(二部)》通则1102非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法，以及通则1103非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法和通则1104非无菌兽药微生物限度标准进行方法适用性试验，建立适合双葛止泻口服液的微生物限度检查方法。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 仪器 集菌仪，型号HTY-602，浙江泰林生物技术股份有限公司；电子天平，型号JA2003，上海上平仪器有限公司；电热恒温培养箱，型号DNP-9272BS-Ⅲ，上海新苗医疗器械制造有限公司；生化培养箱，型号SPX-150BSH-Ⅱ，上海新苗医疗器械制造有限公司；生物安全柜，型号Nu-425-400S，美国Nuaire公司；……