张 梅，谢祥红，魏文波，张 欣，邹 艳，何艳红，邓 勇

近年来，碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant enterobacteriaceae，CRE)的检出率在全球范围内呈逐年增高趋势，给社会公共健康领域带来严重威胁[1]。自2017年以来，武警四川总队医院CRE比例明显升高。本研究其中碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(carbapenemresistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)比例升高尤为突出。全国范围已有较多CRKP耐药基因的研究报道，而本院尚缺乏相关的研究资料。为了解武警四川总队医院CRKP耐药情况和耐药基因分布，收集武警四川总队医院2017-08至2020-03临床分离的CRKP，用改良碳青霉烯灭活实验(mCIM)和酶抑制剂增强试验联合检测CRKP的碳青霉烯酶表型情况，用GeneXpert对常见耐药基因进行检测，以了解我院CRKP流行情况，为临床CRKP感染治疗和医院感染防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 武警四川总队医院2017-8至2020-03临床分离的CRKP 32株，剔除同一患者重复菌株。质控菌株大肠埃希菌ATCC25922，大肠埃希菌ATCC35218，肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1705，肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1706，均由四川省临床检验中心馈赠。

1.2 仪器及试剂 细菌的鉴定和药敏用美国贝克曼公司Microscan.Walk Away96全自动细菌鉴定药敏分析仪。药敏折点严格按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)2017版判断,头孢哌酮/舒巴坦折点按肝杆菌科头孢哌酮折点，替加环素折点按FDA标准判断。药敏纸片购自温州康泰生物科技有限公司。酶抑制剂增强试验购自上海原科实业发展有限公司。耐药基因检测采用美国塞佩公司Gene-Xpert Carba-ⅩⅤⅠR2全自动病原体快速检测系统。

1.3 mCIM试验 用1 μl接种环取血平板上过夜孵育的待测菌满环接种至2 ml TSB中……