齐月，刘彦彤，张航，赵增杰

痛性糖尿病周围神经病变(painful diabetic periphe-ral neuropathy,PDPN)属于糖尿病引起周围神经功能障碍、神经电生理等指标异常以及相关临床症状的并发症，1型糖尿病患病率大约占5%，2型糖尿病患病率大约占20%[1]。临床上以自发性疼痛、接触性疼痛、痛觉过敏等症状为主，严重影响患者睡眠、情绪等生活质量。然而其发病机制尚不明确，认为与炎性反应、氧化应激、多元醇通路激活、代谢紊乱、糖基化终产物堆积等有关[2]。目前对于PDPN治疗比较棘手，主要采取控制血糖、改善微循环、营养神经、抗氧化应激、改善代谢、止痛等手段来缓解症状，而尚无有效方法来逆转PDPN的进展,因此其治疗成为一大难题[3]。中药复方木丹颗粒具有益气活血、通络止痛功效，是临床上第一个治疗糖尿病周围神经病变疗效明确的创新性中成药，充分发挥中医药多靶向、多途径性作用，目前已经写入中医治疗PDPN临床路径之中[4]。现观察木丹颗粒是否通过PI3K/AKT信号通路发挥对PDPN调控作用的，报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 (1)实验动物：健康SPF级Wistar雄性大鼠90只，8周龄，平均体质量(180.0±23.5)g，购自辽宁长生生物技术有限公司[合格证号：SCXK(辽)2013]，饲养于辽宁中医药大学动物实验中心，室温(21±3)℃，相对湿度(55～65)%，噪音<60 dB，分笼饲养，每笼5只，每日光照12 h，通风良好，普通饲料喂养，自由进食水。(2)药物与试剂：木丹颗粒(营口奥达制药有限公司生产)；甲钴胺片(北京星昊医药股份有限公司生产)；链脲佐菌素(STZ，美国Sigma公司生产，采购于沈阳市皇姑区普祥生物试剂经销处)；PCR试剂盒(大连宝生物工程有限公司生产)；PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT一抗和二抗(湖北雪瑾生物技术有限公司生产)。(3)仪器设备：血糖仪(美国强生)，Vonfrey仪(上海玉研科学仪器有限公司)，酶标仪(Thermo-Fisher)，离心机(Thermo-Fisher)，电泳仪(biorad)，凝胶成像仪(biorad)，定量PCR仪(biorad)。

1.2 实验方法 2018年11月—2019年4月在辽宁中医药大学实验中心进行实验。

1.2.1 造模与分组：将雄性Wistar大鼠90只适应喂养7 d后，随机选取12只为正常组(CON组)，其余78只大鼠进行造模，正常组将等体积的0.1 mol/L枸橼酸盐缓冲液单次腹腔注射，造模大鼠按STZ 53 mg/kg一次性腹腔注射，继……