张士强 吴婷婷 李芸 周张杰 杨蕴 蒋海燕 夏晓婷 钟薏

骨骼是各种恶性肿瘤发生转移后较常累及的器官，其中肺癌患者中约有一半以上会发生骨转移，且骨转移多发生在肺癌晚期，严重影响患者的生存质量[1-2]。肺癌发生骨转移可引起骨痛、病理性骨折、神经压迫及高血钙等表现，严重者可危及生命[3]。目前临床上针对肺癌骨转移的治疗手段主要是化疗、放疗、手术治疗及药物治疗[4]。近年来中药治疗逐渐用于肿瘤治疗方面，且在抗肿瘤转移的研究上取得了一定进展，国内研究者采用补肾方治疗肿瘤骨转移发现补肾法可以明显延长出现新的转移灶的时间[5]。相关文献报道骨保护蛋白、核因子-κB受体活化因子和核因子-κB受体活化因子配体三种因子可通过参与破骨细胞的活化及发育过程参与肺癌骨转移的过程[6]。本研究从RANKL/RANK/OPG系统进一步探讨补肾法对肺癌骨转移抑制的作用机制，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料、试剂、药物及仪器

C57BL/6雄性小鼠，由上海中医药大学动物实验中心提供，并在无特殊病原体(SPF级)环境下饲养。Lewis肺癌细胞株；甲醇(上海振兴化工厂)；唑来磷酸(上海药物食品检验所批号为100778-200501)；补肾方由本院药剂科提供，其主要成分有淫羊藿30 g，山茱萸30 g，骨碎补30 g，山慈菇30 g，壁虎9 g，制附子12 g，女贞子30 g，干蟾皮9 g，鳖甲9 g，蜂房9 g，自然铜30 g，黄精15 g，延胡索30 g。

1.2 左后肢股骨注射Lewis肺癌细胞株制备肺癌骨转移动物模型

取对数生长期体外培养的Lewis肺癌细胞株，造模前一天将其换上新鲜培养液，造模当天用平衡盐溶液PBS制成含0.5×108个/mL细胞悬液浓度(含细胞1×106个)的单细胞悬液。……