王莎莎付 瑞王 吉岳秉飞

(中国食品药品检定研究院,北京 102629)

鼠痘病毒(ectromelia virus,ECTV)是一类有囊膜,基因组为180 ～200 kb 大小的线性双股DNA 病毒,是动物病毒中体积大、结构最复杂的DNA 病毒,病毒粒子呈卵圆形或砖形,大小为230 nm×170 nm,在分类上属于痘病毒科,脊索动物痘病毒亚科,正痘病毒属。 ECTV 的自然宿主为小鼠,1930 年首次在英国的实验小鼠种群中分离,随后在墨西哥、日本、美国、中国均有发现[1]。 ECTV 多呈爆发性流行,致死率较高,常造成全群淘汰,危害极大。 不同宿主的易感性不同,临床上急性感染小鼠以四肢、尾和头部肿胀、溃烂、坏死甚至脚趾脱落为特征,故又称脱脚病,而隐性带毒鼠通常没有明显症状,为实验小鼠种群的重大安全隐患。 实验室常用酶联免疫吸附试验检测ECTV 抗体进行日常监测,而隐性带毒鼠的血清抗体水平较低,血清学检测方法有可能造成假阴性[2],且感染动物的病毒抗体的产生存在空窗期,因此,对实验小鼠的ECTV 核酸筛查在感染初期非常重要。 本研究建立了ECTV 特异灵敏的TaqMan 探针法实时荧光定量PCR(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)检测方法,能够实现快速批量检测,且首次在黄鼠组织中检测到ECTV 核酸,提示在使用实验用动物时还需重视ECTV 的感染情况。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物

22 只6 周龄雄性(18～22 g)清洁级小鼠来自中国食品药品检定研究院动物生产供应室[SCXK(京)2017-0005],[SYXK(京)2017-0013],63 只14～34 月龄屏障环境饲养裸鼹鼠,重22g ～42g, 其中雌性31 只,雄性32 只,由海军军医大学提供[SCXK(沪)2017-0002]。 动物饲养于屏障设施[SYXK(沪)2017-0004]。 由中国食品药品检定研究院审批通过(中检动(福)第2019(A)001 号),所有动物均按3R 原则给予人道的关怀。……