郭正昌赵泽玉张宗耀周 翔周 波

(安徽医科大学第一附属医院普外科,合肥 230032)

小肠类器官是小肠干细胞在体外进行3D 培养时,以连续分化的方式形成的一种多细胞类型的三维结构,其与体内小肠上皮的生理结构和功能有很大的相似性。 作为一个新的小肠上皮研究模型,由Clever 教授及其团队[1]于2009 年通过体外三维培养富含亮氨酸重复序列的G 蛋白偶联受体(Lgr5)基因表达的肠道干细胞率先完成体外的构建。

研究表明,许多肠道疾病的病变起始于肠道上皮,在炎症性肠病中肠道上皮中的杯状细胞水平降低导致粘蛋白的分泌减少,这也被认为是炎症性肠病的一个特征性标志[2]。 另外,许多肠道感染性疾病也被证实与病原体和肠道上皮细胞之间的相互作用有关。 现已有研究者开始利用小肠类器官模型来开展病原体与宿主之间的相互作用关系及其致病机制的研究[3-5]。 此外,小肠作为人重要的器官之一,执行着消化、吸收、分泌、免疫屏障等多方面的功能,肠道疾病的发生也与肠道屏障的破坏有关[6-9]。 小肠类器官作为模拟体内小肠上皮的模型,自成功构建以来,已在肠道感染性疾病[10]、再生医学[11]、肿瘤学[12]、药理学[13]和营养学[14]的研究中得以应用,然而,现在国内关于小肠类器官的研究鲜有开展。

由于小肠类器官的构建步骤复杂,模型构建尚未成熟,本研究着重探索及优化小肠隐窝的分离、培养、小肠类器官传代、冻存及复苏的方法,在此基础上研究R-Spondin1(R 脊椎蛋白1)浓度对小肠类器官形成的影响及小肠类器官的蛋白提取方法。……